Anticorpo Monoclonal Anti-UBE4B para WB, ELISA - O95155

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da UBE4B

• A UBE4B (Fator de Conjugação de Ubiquitina E4 B) é uma proteína de múltiplos domínios que atua tanto como uma ubiquitina ligase E3 quanto E4 no sistema ubiquitina-proteassoma.
• Ela catalisa a transferência de ubiquitina das enzimas E2 para substratos e pode montar cadeias de poliubiquitina em alvos pré-ubiquitinados, facilitando a degradação pelo proteassoma.
• No músculo estriado, a UBE4B coopera com a STUB1 e a VCP/p97 para ubiquitinar a chaperona de miosina UNC45B, uma etapa crítica para a regulação da montagem da miosina. Referências relacionadas: PMID:17369820
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus papéis em diversos processos celulares.
• A UBE4B é predominantemente expressa em ovário, testículo, coração e músculo esquelético no nível de transcrito, e é detectada em miotubos diferenciados no nível de proteína. A expressão é baixa em cólon, timo e leucócitos do sangue periférico, e quase indetectável em pulmão e baço. Referências relacionadas: PMID:17369820 PMID:11802788
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e acetilação; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas, potencialmente modulando sua atividade e interações.
• O domínio de dedo de zinco do tipo RING é essencial para sua atividade de ligase E3, e a estrutura tridimensional da proteína foi estudada para entender os mecanismos de reconhecimento de substrato.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-100 dentro do N-terminal da UBE4B humana. Considere verificar a especificidade do anticorpo por western blot usando lisados de tecidos com alta expressão de UBE4B, como coração ou músculo esquelético.
• Para aplicações de WB, uma banda em torno de 146 kDa é esperada. Devido ao grande tamanho da proteína, garanta condições adequadas de transferência de proteína (ex.: tempo de transferência suficiente) e use marcadores de peso molecular apropriados.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada com a UBE4B de camundongo e rato; experimentos piloto nessas espécies devem incluir controles apropriados para confirmar a reatividade e especificidade.
• Protocolos de ELISA podem exigir otimização do tampão de revestimento e da concentração do anticorpo; o anticorpo pode ser usado para detecção direta de antígeno ou como componente de um par de captura/detecção.

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