Anticorpo policlonal de coelho anti-UBQLN4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NRR5

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de UBQLN4

• UBQLN4 (Ubiquilin-4), também denominado A1Up ou CIP75, é um fator de direcionamento proteassomal que medeia a degradação de proteínas mal dobradas, mal localizadas ou acumuladas. Referências relacionadas: PMID:15280365, PMID:27113755, PMID:29666234

• Por meio de seu domínio UBA, liga-se a cadeias de poliubiquitina nos substratos, enquanto seu domínio semelhante à ubiquitina (UBL) interage com o proteassoma, facilitando a entrega do substrato. Referências relacionadas: PMID:15280365, PMID:27113755, PMID:30612738

• É um regulador crítico do reparo do DNA: após a fosforilação mediada por ATM, UBQLN4 é recrutado para quebras de fita dupla, onde se liga ao MRE11 ubiquitinado e o remove para degradação proteassomal, suprimindo a recombinação homóloga e promovendo a NHEJ. Referências relacionadas: PMID:30612738

• A proteína reconhece especificamente proteínas transmembrana mal localizadas e, em conjunto com DESI1/POST, exporta cargas ubiquitinadas do núcleo para o citoplasma para degradação. Referências relacionadas: PMID:27113755, PMID:29666234

• UBQLN4 atua como um adaptador da autofagia, recrutando UBQLN1 para os autofagossomos e para LC3, e potencialmente facilitando a fusão entre autofagossomos e lisossomos. Referências relacionadas: PMID:23459205

• Subcelularmente, UBQLN4 é encontrado no núcleo, no citoplasma, nos cromossomos, no retículo endoplasmático, na região perinuclear e em vesículas autofágicas.

• É mais abundante no pâncreas, rim, músculo esquelético, coração e cérebro; níveis mais baixos são detectados na placenta, no pulmão e no fígado.

• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação dependente de ATM e formação de ligações isopeptídicas; a proteína está associada a doenças neurodegenerativas e à esclerose lateral amiotrófica (ELA).

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 366-432). Essa região pode ser menos conservada entre as espécies; verifique a homologia da sequência com a espécie-alvo caso o produto seja destinado a amostras não humanas.

• Como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser confirmada usando um controle positivo caracterizado (por exemplo, lisado celular de HeLa ou HEK293). Espera-se uma banda de aproximadamente 64 kDa em WB.

• Para IHC-P e IF/ICC, considere as condições de recuperação antigênica e otimize a diluição do anticorpo primário. Esperam-se padrões de coloração nuclear e citoplasmática com base na localização da proteína; valide em tecidos conhecidos por apresentarem alta expressão (por exemplo, pâncreas e rim).

• De acordo com os dados do fornecedor, o anticorpo apresenta reatividade cruzada com camundongo e rato; ao utilizar essas espécies, confirme a especificidade por meio de knockdown com siRNA ou validação em modelo knockout.

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