Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-ULBP1 para WB, ELISA - Q9BZM6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ULBP1

• A ULBP1 (proteína 1 ligadora de UL16), também conhecida como ALCAN-beta, ligante 1 de NKG2D (N2DL-1/NKG2DL1) e transcripto precoce de ácido retinoico 1I, é uma glicoproteína de superfície celular pertencente à família RAET1. Ela compartilha similaridade estrutural com moléculas de MHC de classe I, mas não apresenta peptídeos.
• A função principal da ULBP1 é se ligar e ativar o receptor KLRK1/NKG2D nas células natural killer (NK), desencadeando assim a citotoxicidade mediada por células NK e a liberação de citocinas, um processo crucial para a vigilância imunológica contra células infectadas ou transformadas.
• A ULBP1 é uma proteína de membrana ancorada por GPI, localizada principalmente na membrana celular, mas também é detectada no retículo endoplasmático, refletindo seu processamento e regulação na via secretora.
• A ULBP1 é expressa em uma grande variedade de tecidos, incluindo células imunológicas (células T, células B), linhagens de eritroleucemia e órgãos como coração, cérebro, pulmão, fígado, testículo, linfonodo, timo, amígdala e medula óssea, além de tecidos fetais (coração, cérebro, pulmão, fígado), indicando que desempenha papéis tanto imunes quanto não imunes.
• Como ligante induzido por estresse, a ULBP1 tem sua expressão aumentada em resposta a danos no DNA, infecção viral e transformação celular, servindo como um "sinal de perigo" para eliminar células comprometidas. Sua expressão pode ser explorada por vírus (por exemplo, o citomegalovírus) para escapar da detecção imunológica.
• As características pós-traducionais principais incluem um peptídeo sinal para secreção, uma âncora GPI para fixação na membrana, glicosilação N-ligada e uma ou mais pontes dissulfeto, que estabilizam seu domínio extracelular para a interação com NKG2D.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno consiste em uma proteína de fusão recombinante correspondente à região N-terminal (aminoácidos 1–100) da ULBP1 humana (NP_079494.1). Este fragmento cobre o peptídeo sinal e parte do domínio extracelular, o que pode ser adequado para detectar tanto a ULBP1 endógena de comprimento total quanto a recombinante.
• Para aplicações de western blot (WB), considere usar lisados de células totais de linhagens que expressam ULBP1, como K562 (eritroleucemia) ou Jurkat (leucemia de células T). Dado o peso molecular previsto de ~28 kDa (proteína central; a glicosilação pode aumentar a massa aparente), otimize as condições redutoras e a quantidade de proteína carregada.
• O anticorpo também reage cruzadamente com a ULBP1 de camundongo, o que o torna uma ferramenta potencial para estudos entre espécies. No entanto, valide a reatividade no modelo de tecido ou célula de camundongo relevante, pois a conservação do epitopo pode afetar o desempenho.
• No ELISA, considere combinar este anticorpo monoclonal com um anticorpo de detecção policlonal para estabelecer um ensaio sanduíche para a ULBP1 solúvel, que pode ser liberada da superfície celular. Otimize as etapas de revestimento e detecção para obter maior sensibilidade.

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