Anticorpo Policlonal Anti-ULK1/ULK2 para WB, ELISA - O75385 / Q8IYT8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ULK1

• O ULK1 é uma serina/treonina quinase essencial para o início da autofagia, atuando a montante do complexo PI3K para regular a formação do autofagossomo em resposta à privação de nutrientes. Referências relacionadas: PMID:18936157, PMID:21460634, PMID:21795849
• Participa de loops de feedback com mTORC1 e AMPK, regulando e sendo regulado por essas vias de sensação de energia para ajustar finamente a autofagia. Referências relacionadas: PMID:21795849, PMID:21460634
• O ULK1 fosforila múltiplos alvos a jusante, incluindo AMBRA1, ATG4B, FLCN, SESN2 e SQSTM1, para coordenar a nucleação, alongamento e reconhecimento de carga do autofagossomo. Referências relacionadas: PMID:20921139, PMID:28821708, PMID:25126726, PMID:25040165, PMID:37306101
• Além da autofagia, o ULK1 desempenha um papel na diferenciação neuronal precoce e é necessário para a formação do axônio das células granulares. Referências relacionadas: PMID:11146101
• O ULK1 localiza-se principalmente no citoplasma e citossol, e transloca para estruturas pré-autofágicas após a indução da autofagia.
• É expresso de forma onipresente em tecidos adultos, com níveis detectáveis no músculo esquelético, coração, pâncreas, cérebro, placenta, fígado, rim e pulmão.
• O anticorpo visa uma região N-terminal conservada (aa 1–283) e reconhece tanto o ULK1 quanto seu homólogo ULK2 (Q8IYT8), permitindo a detecção abrangente das quinases da família ULK.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio inclui o domínio quinase N-terminal (aa 1–283), que é crítico para a atividade catalítica. Este design pode permitir a detecção tanto do ULK1/ULK2 total quanto fosforilado, mas a especificidade do estado de fosforilação deve ser validada experimentalmente.
• Para Western blot, considere o uso de lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas sob condições estimuladoras de autofagia (por exemplo, privação de aminoácidos ou tratamento com rapamicina) para observar alterações na expressão proteica ou mudança de mobilidade.
• Os protocolos de ELISA podem exigir otimização da concentração do antígeno de revestimento, tampões de bloqueio e diluição do anticorpo para alcançar razões ideais de sinal-ruído.
• Como a reatividade cruzada é relatada apenas para humanos, valide o anticorpo na matriz de amostra apropriada se estiver usando amostras derivadas de humanos em seu sistema de ensaio.

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