Anticorpo Monoclonal Anti-ULK3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6PHR2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ULK3

• ULK3 (Unc-51-like kinase 3) é uma proteína quinase serina/treonina que atua como um regulador chave da sinalização smoothened na via hedgehog e na iniciação da autofagia. Referências relacionadas: PMID:19279323 PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• Na presença de ligantes hedgehog (DHH, IHH, SHH), a ULK3 autofosforila e fosforila GLI2 (e, em menor grau, GLI1 e GLI3), promovendo sua dissociação da SUFU, translocação nuclear e ativação transcricional. Referências relacionadas: PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• Na ausência do ligante hedgehog, a ULK3 interage com a SUFU, o que inativa sua atividade quinase e impede a fosforilação da proteína GLI, garantindo a repressão da via. Referências relacionadas: PMID:20643644

• Além da sinalização hedgehog, a ULK3 induz autofagia em resposta à senescência celular, ligando-a ao controle de qualidade celular e ao envelhecimento. Referências relacionadas: PMID:19279323

• A ULK3 está localizada principalmente no citoplasma e é amplamente expressa em tecidos, com níveis mais altos no cérebro fetal e no cérebro, fígado e rim adultos; dentro do sistema nervoso, é particularmente abundante no hipocampo.

• A proteína contém domínios quinase, sítios de ligação de ATP e sofre splicing alternativo; é classificada na família das proteínas quinases serina/treonina e é uma fosfoproteína conhecida.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde aos aminoácidos 373–472 da ULK3 humana, uma região dentro do domínio quinase. Os pesquisadores podem considerar esta localização do epítopo ao projetar reagentes de detecção complementares.
• Este anticorpo foi testado em WB, IF/ICC e ELISA. Para imunoblotting, a banda esperada é de aproximadamente 53 kDa; isoformas potenciais do splicing alternativo podem aparecer em tamanhos diferentes e devem ser validadas no sistema de amostra relevante.
• Levando em consideração a reatividade cruzada com humano e camundongo, recomenda-se um experimento piloto com controles positivos e negativos apropriados para confirmar a especificidade antes de estudos em larga escala.
• Para aplicações de IF/ICC, os métodos de fixação e permeabilização celular devem ser cuidadosamente otimizados, pois a ULK3 é uma proteína citoplasmática.
• A atividade quinase e a ativação da via podem afetar a expressão da ULK3; portanto, usar amostras onde a sinalização hedgehog ou a autofagia é modulada pode ajudar a avaliar o desempenho do anticorpo.

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