Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ULK4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q96C45

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ULK4

• A ULK4 é uma pseudocinase pertencente à família das quinases tipo Unc-51, também conhecida como FAM7C1 e REC01035, caracterizada pela falta de atividade quinase catalítica, funcionando em vez disso como um adaptador molecular.
• Na via de sinalização hedgehog, a ULK4 atua no cílio primário para mediar a associação entre a quinase STK36 e o fator de transcrição GLI2, promovendo a fosforilação de GLI2 e a subsequente liberação da inibição por SUFU, permitindo a translocação nuclear de GLI2 e a ativação de genes-alvo. Referências relacionadas: PMID:38096226
• A ULK4 está localizada em projeções celulares, especificamente no cílio, consistente com seu papel na transdução de sinal hedgehog ciliar.
• Ao nível proteico, a expressão de ULK4 é predominantemente detectada no cérebro, particularmente em neurônios pós-mitóticos, incluindo neurônios GABAérgicos, e está ausente em astrócitos.
• A proteína possui um domínio de ligação a ATP e capacidade de ligação a nucleotídeos, embora sua classificação como pseudocinase implique uma utilização não canônica de nucleotídeos.
• Contém múltiplas regiões de repetição e está sujeita à fosforilação, conforme indicado por identificação proteômica, sugerindo modificações pós-traducionais regulatórias.
• A função adaptadora da ULK4 na ativação de GLI2 é crítica para a sinalização hedgehog adequada, que governa o desenvolvimento embrionário, a manutenção de células-tronco e a regeneração tecidual.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, dado o alto peso molecular da ULK4 (aproximadamente 142 kDa), considere usar um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, 6-8%) com tempos de transferência estendidos para garantir uma transferência proteica eficiente.
• Em imunofluorescência ou imunocitoquímica, como a ULK4 se localiza nos cílios, otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar as estruturas ciliares e confirme a co-localização com marcadores ciliares, como a tubulina acetilada ou Arl13b.
• Valide a especificidade do anticorpo em seu sistema de amostra incluindo linhagens celulares ou tecidos conhecidos por expressar ULK4 (por exemplo, culturas neuronais ou cortes cerebrais) e realizando controles de knockdown/knockout quando possível.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; recomendamos titular cada novo lote e incluir controles positivos e negativos apropriados em cada experimento.
• Para aplicações de ELISA, certifique-se de que o imunógeno recombinante ou a proteína ULK4 de comprimento total seja usada para revestimento, a fim de confirmar a reatividade e determinar as diluições de trabalho ideais.

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