Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-UPF1/RENT1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q92900

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da UPF1/RENT1

• UPF1 (Regulador de transcritos nonsense 1), também conhecida como RENT1, NORF1, hUpf1, é uma helicase de RNA dependente de ATP essencial para a degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD), uma via de vigilância que degrada mRNAs aberrantes com códons de parada prematura e também modula a expressão de mRNAs normais.

• A proteína é recrutada para ribossomos em tradução após a terminação, onde forma o complexo transiente SURF (SMG1-UPF1-eRF1-eRF3). Na NMD dependente de EJC, esse complexo se associa ao complexo de junção de éxons por meio de UPF2, formando o complexo de vigilância UPF1-UPF2-UPF3 que desencadeia a degradação do mRNA.
  Referências relacionadas:
  PMID:19417104
  PMID:21419344

• UPF1 passa por um ciclo crítico de fosforilação-desfosforilação. Sua fosforilação pela quinase SMG1 é uma etapa chave na NMD, e a desfosforilação pela PP2A permite a reciclagem dos fatores de NMD.
  Referências relacionadas:
  PMID:11544179
  PMID:25220460

• UPF1 também pode ativar a NMD independentemente de UPF2 e UPF3, indicando vias alternativas de NMD.
  Referências relacionadas:
  PMID:18447585

• Além da NMD, UPF1 desempenha um papel na degradação de mRNA de histona dependente de replicação no final da fase S, uma função independente de UPF2.
  Referências relacionadas:
  PMID:16086026
  PMID:18172165

• UPF1 possui atividade de helicase 5'-3' dependente de ATP em substratos RNA:DNA, RNA:RNA e DNA:DNA. Também tem atividade ATPase estimulada por ssDNA e se liga a RNA; a adição de ATP diminui a ligação ao RNA.
  Referências relacionadas:
  PMID:10999600
  PMID:18066079
  PMID:26138914

• Subcelularmente, UPF1 é principalmente citoplasmática, mas também se localiza em corpos P, região perinuclear e núcleo.

• Palavras-chave associadas a UPF1 incluem Helicase, Ligação a ATP, Dedo de Zinco, Fosfoproteína, Degradação de mRNA mediada por nonsense e Interação hospedeiro-vírus.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-100) da UPF1 humana; este anticorpo pode reconhecer a UPF1 de comprimento completo e quaisquer isoformas que compartilhem essa sequência N-terminal.
• O peso molecular previsto é de 124 kDa; para Western blotting, considere usar uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, 8% de SDS-PAGE) e tempo de transferência suficiente para proteínas de alto peso molecular.
• Este anticorpo monoclonal de coelho oferece alta especificidade e baixo background; foi validado para WB, IF/ICC, IP e ELISA. Para cada aplicação, titule o anticorpo e valide no sistema de amostras relevante.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é confirmada, tornando-o adequado para estudos nesses organismos modelo; no entanto, os níveis de expressão endógena podem variar entre tecidos e linhagens celulares.
• Para IF/ICC, incorpore etapas adequadas de fixação e permeabilização e use o anticorpo em uma diluição otimizada para o seu contexto celular específico.

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