Anticorpo policlonal de coelho anti-USP15 para WB, IP, IF/ICC, ELISA - Q9Y4E8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da USP15

• USP15 (Unph-2, Unph4) é uma enzima desubiquitinante pertencente à família das proteases específicas de ubiquitina.
• Funciona como uma hidrolase que remove a ubiquitina conjugada de proteínas alvo, regulando vias como a sinalização do receptor TGF-beta, NF-kappa-B e a via RNF41/PRKN. Referências relacionadas: PMID:16005295 PMID:17318178 PMID:19576224
• Na sinalização TGF-beta, a USP15 desubiquitina os R-SMADs monoubiquitinados (SMAD1/2/3) para promover a ativação de genes alvo, ou alternativamente estabiliza o TGFBR1 por meio da desubiquitinação. Referências relacionadas: PMID:21947082 PMID:22344298
• A USP15 desubiquitina a histona H2B, potencialmente regulando a expressão gênica e o reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:24526689
• Inibe a mitofagia ao neutralizar a parkina, clivando cadeias de poliubiquitina em substratos mitocondriais como MFN2. Referências relacionadas: PMID:24852371
• A USP15 está envolvida na organização de endossomos por meio da desubiquitinação de SQSTM1 e regula negativamente a imunidade antifúngica ao desubiquitinar CARD9. Referências relacionadas: PMID:27368102 PMID:33093067
• A USP15 localiza-se no citoplasma, núcleo e mitocôndrias, e é expressa em músculo esquelético, rim, coração, placenta, fígado, timo, pulmão e ovário.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Dado o imunogênio de péptido sintético, o anticorpo provavelmente reconhece o epítopo especificado. Valide a especificidade em modelos de knockout ou knockdown, se possível.
• Para Western blotting, a proteína USP15 migra em aproximadamente 112 kDa. Use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, Tris-Glicina a 8%) e garanta uma transferência completa para proteínas de alto peso molecular. Considere uma transferência úmida em baixa voltagem durante a noite.
• Em imunoprecipitação, um pAb derivado de péptido sintético pode ter bom desempenho. Faça a reticulação do anticorpo com beads de Proteína A/G se as cadeias de anticorpos co-eluídas interferirem na detecção do alvo em ~112 kDa.
• Para imunofluorescência/ICC, considere a localização dupla nuclear e citoplasmática/mitocondrial da USP15. Otimize a permeabilização (por exemplo, 0,1% Triton X-100) para permitir o acesso do anticorpo a todos os compartimentos.

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