Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-USP30 para WB, IF/ICC, ELISA - Q70CQ3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do USP30

• USP30 (Hidrolase ubiquitina carboxi-terminal 30) é uma enzima desubiquitinante também conhecida como enzima desubiquitinante 30, tioesterase ubiquitina 30 e protease de processamento específica de ubiquitina 30, codificada pelo gene USP30.
• Ancorado à membrana externa mitocondrial, o USP30 atua como um inibidor chave da mitofagia, contrariando a ação da parkina (PRKN); ele hidrolisa a ubiquitina anexada pela parkina em proteínas alvo, como RHOT1/MIRO1 e TOMM20, bloqueando assim a capacidade da parkina de impulsionar a mitofagia. Referências relacionadas: PMID:18287522 PMID:24896179 PMID:25527291
• Cliva preferencialmente cadeias de poliubiquitina ligadas por 'Lys-6' e 'Lys-11', dois tipos de ligação envolvidos na sinalização mitofágica; não cliva eficientemente a poliubiquitina fosforilada em 'Ser-65'. Referências relacionadas: PMID:25621951 PMID:25527291
• Regula negativamente a fusão mitocondrial mediando a desubiquitinação de MFN1 e MFN2.
• Localização subcelular: membrana externa da mitocôndria; contém uma hélice transmembrana.
• Especificidade de tecido: expresso no músculo esquelético, pâncreas, fígado e rim.
• Pertence à família de peptidases C19; classificado como uma protease de tiol e hidrolase envolvida na via de conjugação da ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 57-390 do USP30 humano, cobrindo o núcleo catalítico; considere a conservação desta região ao avaliar a reatividade em camundongo e rato.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em torno de 59 kDa; valide o tamanho da banda detectada em seu sistema de amostra específico, pois modificações pós-traducionais podem alterar a migração.
• Em imunofluorescência/ICC, deve-se antecipar a coloração da membrana externa mitocondrial; recomenda-se a contracoloração com um marcador mitocondrial para confirmar a localização.
• Para aplicações de ELISA, otimize as condições de revestimento e as diluições do anticorpo usando um padrão de proteína USP30 recombinante, se disponível.
• Ao estudar a regulação da mitofagia, considere a manipulação farmacológica ou genética concomitante da parkina para avaliar a atividade da desubiquitinase USP30 em seu modelo.

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