Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-USP5 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45974

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da USP5

• USP5 (Ubiquitina carboxi-terminal hidrolase 5), também conhecida como Isopeptidase T, é uma enzima desubiquitinate que cliva ligações isopeptídicas entre ubiquitina e proteínas alvo, regulando vias de sinalização chave como NF-kappa-B, Wnt/beta-catenina e produção de citocinas.
• Ela promove a sinalização Wnt por meio da desubiquitinação e estabilização de FOXM1, o que por sua vez facilita o recrutamento de beta-catenina aos promotores de genes alvo de Wnt. Referências relacionadas: PMID:26912724
• USP5 regula a montagem e desmontagem de grãos de estresse induzidos por calor ao mediar a hidrólise de cadeias de ubiquitina não ancoradas. Referências relacionadas: PMID:29567855
• Na imunidade inata, ela estabiliza TXNIP para promover a apoptose induzida por lipopolissacarídeo e a resposta inflamatória. Referências relacionadas: PMID:37534934
• USP5 atua como um regulador negativo da autofagia ao modular ULK1 tanto em nível de proteína quanto de mRNA. Referências relacionadas: PMID:37607937
• Ela regula negativamente a produção de interferão tipo I ao remover as cadeias de poliubiquitina ligadas a Lys-48 e Lys-63 do IRF3. Referências relacionadas: PMID:39761299
• USP5 influencia o reparo de incompatibilidades de DNA ao estabilizar MLH1, neutralizando a ação da ubiquitina ligase UBR4. Referências relacionadas: PMID:39032648
• Após a estimulação por insulina, a fosforilação de USP5 mediada por mTORC1 aumenta a estabilidade de YTHDF1 ao remover a poliubiquitinação ligada a Lys-11. Referências relacionadas: PMID:39900921
• Subcelularmente, a USP5 encontra-se predominantemente no citoplasma, mas também está presente em grãos de estresse e no núcleo, refletindo seus diversos papéis funcionais.
• Ela pertence à família das peptidases C19 e contém domínios de dedo de zinco, o que indica sua atividade catalítica dependente de metais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os resíduos 1–280 da USP5 humana, localizados no N-terminal; isso pode favorecer a detecção de isoformas de comprimento total e isoformas do N-terminal em condições desnaturantes e nativas.
• Para Western blotting, é esperada uma banda próxima a 96 kDa; considere incluir controles positivos e negativos para confirmar a especificidade em lisados de humano, camundongo ou rato.
• Em IHC-P, as condições de recuperação de antígeno devem ser otimizadas para o tecido específico; titule a concentração do anticorpo para reduzir o fundo.
• Para IF/ICC, a co-coloração com marcadores de grãos de estresse ou marcadores nucleares pode ajudar a validar alterações na localização da USP5 sob condições de estresse ou perturbações de sinalização.
• Ensaios de ELISA devem usar peptídeos ou substratos de proteína recombinante cuidadosamente projetados para testar a atividade da desubiquitinase se estudos funcionais forem planejados.
• Dada a reatividade múltipla entre espécies, este anticorpo pode ser uma ferramenta útil para transladar resultados obtidos em modelos de roedores para sistemas humanos.

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