Anticorpo policlonal de coelho anti-USP9X/USP9Y para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00507

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de USP9X/USP9Y

• USP9Y, também conhecida como hidrolase 9Y da extremidade carboxil-terminal da ubiquitina, enzima desubiquitinadora FAF-Y ou proteína relacionada a Fat facets ligada ao cromossomo Y, é membro da família das proteases específicas de ubiquitina (USP).
• Codificada pelo gene USP9Y (nome alternativo DFFRY) no cromossomo Y, funciona como uma desubiquitinase que cliva a ubiquitina das proteínas substrato, desempenhando um papel na via ubiquitina-proteassoma. Propõe-se que estabilize proteínas importantes para a espermatogênese e a fertilidade masculina. Referências relacionadas: PMID:12895410
• Amplamente expressa em tecidos embrionários e adultos.
• As principais características estruturais incluem um domínio de ligação ao zinco típico das tiol proteases, e a proteína está sujeita à fosforilação e ao splicing alternativo.
• A proteína madura tem peso molecular de aproximadamente 291 kDa.
• A sequência do imunógeno do anticorpo (aminoácidos 2456-2555) é compartilhada entre USP9Y e seu homólogo no cromossomo X, USP9X, permitindo a detecção de ambas as proteínas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blotting, espere uma banda em torno de 291 kDa. Use um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência prolongados para garantir a transferência eficiente de proteínas de alto peso molecular.
• Valide a especificidade do anticorpo no seu sistema de amostra utilizando knockdown por siRNA ou linhagens celulares com níveis de expressão conhecidos de USP9X/USP9Y.
• Considere realizar experimentos de bloqueio com peptídeo utilizando a sequência do imunógeno para confirmar a identidade da banda.
• Para IHC-P, otimize as condições de recuperação antigênica (por exemplo, recuperação de epítopos induzida por calor com tampão de citrato ou EDTA) e teste diferentes diluições do anticorpo.
• Para IF/ICC, utilize protocolos apropriados de fixação e permeabilização para a localização subcelular de USP9X/USP9Y.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; avalie novos lotes em relação a um padrão de referência.

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