Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-VAV1 para WB, ELISA - P15498

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da VAV1

• O gene VAV1 codifica o proto-oncogene vav, um membro da família VAV de fatores de troca de nucleotídeos guanina (GEFs) que ativam as GTPases Rho/Rac.
• A proteína contém múltiplos domínios conservados, incluindo SH2, SH3, um domínio de dedo de zinco e um domínio de homologia Dbl essencial para sua atividade GEF.
• A VAV1 atua como um transdutor de sinal crítico que conecta a sinalização de tirosina quinase à ativação das GTPases Rho/Rac, promovendo assim a diferenciação celular, a proliferação e a reorganização do citoesqueleto.
• A proteína é expressa seletivamente em células hematopoiéticas, incluindo linfócitos e linhagens mieloides, enquanto geralmente está ausente em tecidos não hematopoiéticos.
• A VAV1 sofre splicing alternativo e é regulada por fosforilação em múltiplos resíduos de tirosina, modulando sua atividade GEF e interação com parceiros downstream.
• Os motivos de ligação a zinco e metais na VAV1 são essenciais para sua estabilidade estrutural e função catalítica como fator de liberação de nucleotídeos guanina.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno, que abrange os aminoácidos 374–590 da VAV1 humana, inclui o domínio SH3 e regiões adjacentes conservadas em camundongo e rato; esse design é a base provável da reatividade multiespécie do anticorpo.
• Para Western blotting, espere uma banda próxima a 98 kDa. Para validar a especificidade, use lisados de linhas de células hematopoiéticas (por exemplo, Jurkat, THP-1) e verifique a ausência em células não hematopoiéticas, devido à expressão tecido-restrita da VAV1.
• Em aplicações ELISA, otimize a concentração do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo; a natureza policlonada pode fornecer sinal robusto, mas requer titulação cuidadosa para minimizar o ruído de fundo.
• Devido à especificidade hematopoiética da VAV1, os desenhos experimentais devem incluir controles positivos adequados (por exemplo, células T ativadas) e controles negativos (por exemplo, linhas de fibroblastos) para confirmar a detecção do alvo correto.

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