Anticorpo Monoclonal Anti-VCAM-1/CD106 para FC - P29533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de VCAM-1/CD106

• VCAM-1 (Molécula de Adesão de Células Vasculares 1), também conhecida como CD106, é uma glicoproteína de adesão celular codificada pelo gene Vcam1. Ela é expressa predominantemente na superfície de células endoteliais e desempenha um papel crítico na vigilância imunológica e na inflamação.
• Como um regulador principal da adesão de leucócitos ao endotélio, VCAM-1 medeia a adesão firme de linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos ao endotélio vascular por meio da interação com integrinas (ex.: VLA-4/α4β1).
• Durante respostas inflamatórias, a ligação de VCAM-1 às integrinas de leucócitos desencadeia cascatas de sinalização intracelular, incluindo a ativação de canais de cálcio e da pequena GTPase RAC1, promovendo a migração transendotelial de células imunológicas.
• VCAM-1 também funciona como um ponto de verificação de controle de qualidade para a entrada na medula óssea, fornecendo um sinal de "não coma-me" no contexto da apresentação de MHC classe I, prevenindo a fagocitose de células hematopoiéticas viáveis.
• A proteína existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo; a forma canônica é uma proteína transmembrana de aproximadamente 81 kDa, embora uma forma solúvel de 38 kDa possa ser gerada por clivagem ou splicing alternativo.
• Subcelularmente, VCAM-1 está localizada na membrana celular e pode ser liberada em forma secretada; é altamente expressa no endotélio vascular inflamado, bem como em tipos de células semelhantes a macrófagos e células dendríticas em tecidos normais e inflamados, e na medula óssea.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação; a proteína contém domínios semelhantes a imunoglobulinas e uma hélice transmembrana, classificando-a como membro da superfamília das imunoglobulinas.
• Em condições fisiológicas, a expressão de VCAM-1 é induzida por citocinas como TNF-α e IL-1, e sua superexpressão é uma marca de doenças inflamatórias, tornando-a um alvo valioso para pesquisa diagnóstica e terapêutica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região extracelular N-terminal (aminoácidos 25-310), que inclui o primeiro domínio semelhante a imunoglobulina envolvido na ligação de integrinas; este design favorece o reconhecimento do epitopo extracelular nativo em células vivas, sendo adequado para citometria de fluxo sem permeabilização.
• é um corante fluorescente vermelho brilhante; ao projetar painéis multicoloridos, evite a sobreposição espectral com PE, Texas Red e fluoróforos semelhantes. Considere o uso de controles de compensação apropriados.
• Para citometria de fluxo, realize a titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para coloração específica em linhagens celulares de camundongo ou células primárias que expressam VCAM-1, como células endoteliais bEnd.3 tratadas com TNF-α ou macrófagos derivados de medula óssea.
• Recomenda-se o uso de um corante de viabilidade células vivas/mortas para excluir células mortas, pois células danificadas podem apresentar ligação inespecífica. Inclua um controle de isotipo ou bloqueio de Fc para minimizar o ruído de fundo.
• A reatividade cruzada está confirmada para camundongo; o desempenho em outras espécies não é garantido. Se for usar em tecidos, valide com controles positivos e negativos apropriados.

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