PolimAb® de coelho Anti-VCAM1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P19320 / P29533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da VCAM1

• A proteína de adesão celular vascular 1 (VCAM1), também conhecida como CD106 ou INCAM-100, é uma glicoproteína de adesão celular codificada pelo gene VCAM1 e existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• A VCAM1 medeia principalmente a adesão de leucócitos ao endotélio por meio de interações com integrinas, regulando a migração transendotelial durante a vigilância imunológica e a inflamação. Referências relacionadas: PMID:31310649 PMID:10209034 PMID:22970700
• Ela também atua como ponto de verificação de controle de qualidade na medula óssea, fornecendo um sinal de "não me coma" na apresentação de MHC classe I para evitar a fagocitose. Referências relacionadas: PMID:35210567
• A proteína se localiza na membrana celular e pode ser secretada em forma solúvel, que pode ter funções funcionais distintas.
• A VCAM1 é caracteristicamente expressa no endotélio vascular inflamado e em células semelhantes a macrófagos e células dendríticas, tanto em tecidos normais quanto inflamados.
• A proteína é fortemente glicosilada, contém domínios de imunoglobulina e pontes dissulfeto, e está sujeita a conjugação do tipo ubiquitina, como indicado pelas palavras-chave do UniProt.
• A proteína precursora tem um peso molecular calculado de ~81 kDa; múltiplas bandas observadas (38, 71, 74, 81 kDa) em Western blotting podem refletir a diversidade de isoformas, glicosilação ou processamento proteolítico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 640-739 da VCAM1 humana (UniProt P19320), uma região provavelmente conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que suporta a reatividade multiespécie.
• Para Western blotting (WB), as bandas observadas típicas variam de 38 kDa a 81 kDa devido às isoformas e modificações; recomenda-se o uso de condições redutoras e controles de carregamento apropriados.
• Na imunofluorescência (IF-P) e imunohistoquímica (IHC-P), a marcação de VCAM1 é esperada na membrana plasmática e possivelmente nas vesículas secretoras; valide com tecido conhecido por ter endotélio inflamado.
• O ELISA pode ser usado para detectar VCAM1 solúvel em soro ou sobrenadantes de cultura; observe que o anticorpo reconhece um epítopo peptídico intracelular, portanto, a desnaturação da amostra pode ser necessária para formatos de captura.

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