Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-VCP para WB, IF/ICC, ELISA - P55072

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do VCP

• ATPase transitional do retículo endoplasmático (também denominada p97 ou VCP) que atua como uma chaperona homohexamérica e segregase em várias vias celulares.
• Central para o sistema ubiquitina-proteassoma: o complexo UFD1-VCP-NPLOC4 liga proteínas maldobradas ubiquitinadas e as exporta do RE para degradação no citosol.
• Crucial para a dinâmica do Golgi: necessário para a fragmentação mitótica e remontagem pós-mitótica das pilhas do Golgi, além de facilitar a brotação de vesículas do retículo endoplasmático transitional.
• Recrutado para quebras de fita dupla de DNA de forma dependente de RNF8/RNF168, promovendo o acúmulo de TP53BP1 e contribuindo para o reparo de DNA. (PubMed:22020440, PubMed:22120668) Referências relacionadas: PMID:22020440 PMID:22120668
• Essencial para a autofagia: requerido para a maturação de autofagossomos contendo ubiquitina e media a extração de G3BP1 dos grânulos de estresse para eliminar agregados. (PubMed:20104022, PubMed:27753622, PubMed:38762759, PubMed:29804830, PubMed:34739333) Referências relacionadas: PMID:20104022 PMID:27753622 PMID:38762759 PMID:29804830 PMID:34739333
• Regula negativamente a produção de interferon do tipo I ao interagir com RIGI ubiquitinado, recrutando RNF125 para promover a degradação de RIGI. (PubMed:26471729) Referências relacionadas: PMID:26471729
• Localização subcelular: Encontrado no citoplasma, citosol, retículo endoplasmático, núcleo e grânulos de estresse, o que é consistente com suas funções multifuncionais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 1-100 do VCP humano (P55072). Espera-se que essa região N-terminal gere um anticorpo que reconheça o VCP de comprimento completo (~89 kDa) em western blots desnaturantes.
• Para WB, use condições redutoras padrão; o peso molecular previsto é de 89 kDa, mas modificações pós-traducionais podem causar ligeiros desvios. Valide a carga com controles adequados.
• Para IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas; espera-se que o anticorpo detecte o VCP em suas localizações relatadas (citoplasma, RE, núcleo, grânulos de estresse).
• No ELISA, este anticorpo pode ser usado para detecção sensível de VCP recombinante ou nativo; considere emparelhá-lo com um anticorpo de detecção para ensaios sanduíche.
• A reatividade cruzada com VCP de camundongo e rato já foi demonstrada, o que o torna adequado para estudos nessas espécies; mesmo assim, realize uma validação específica para a espécie no seu sistema modelo.
• Como qualquer anticorpo monoclonal, a consistência entre lotes é típica, mas sempre titule e valide no seu contexto de aplicação específico usando controles positivos e negativos.

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