Anticorpo policlonal de coelho anti-VCP para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55072

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da VCP

• A VCP, também conhecida como p97, TERA ou CDC48, é uma ATPase pertencente à família AAA (ATPases Associadas a diversas Atividades celulares), codificada pelo gene VCP.
• É essencial para a fragmentação e remontagem do complexo de Golgi durante a mitose e está envolvida na formação do retículo endoplasmático de transição (tER).
• Forma um complexo ternário com UFD1 e NPLOC4 para ligar-se a proteínas ubiquitinadas e facilitar sua exportação do RE para o citoplasma, onde ocorre a degradação proteassomal. Medeia a ERAD de CHRNA3 em neurônios corticais por meio do complexo STUB1-VCP-UBXN2A. Referências relacionadas: PMID:26265139
• É recrutada para quebras de fita dupla de maneira dependente de RNF8/RNF168 e promove o recrutamento de TP53BP1. Também remove a DNA polimerase η (POLH) de forquilhas de replicação estagnadas para limitar a mutagênese e participa do reparo de ligações cruzadas DNA-proteína juntamente com SPRTN. Referências relacionadas: PMID:22020440, PMID:22120668, PMID:23042605, PMID:23042607, PMID:32152270
• É essencial para a maturação de autofagossomos contendo ubiquitina e para a eliminação de proteínas ubiquitinadas por autofagia. Medeia a remoção de G3BP1 dos grânulos de estresse. Referências relacionadas: PMID:20104022, PMID:27753622, PMID:38762759, PMID:29804830, PMID:34739333
• Regula negativamente a produção de interferon do tipo I ao interagir com RIGI ubiquitinada, levando à sua degradação. Pode desempenhar um papel na classificação dependente de ubiquitina de proteínas de membrana destinadas aos lisossomos, incluindo as caveolinas. Referências relacionadas: PMID:26471729, PMID:21822278, PMID:23335559
• Está localizada no citoplasma, citosol, retículo endoplasmático, núcleo e grânulos de estresse. Mutações na VCP estão associadas à esclerose lateral amiotrófica (ELA) e à doença de Charcot-Marie-Tooth tipo 2Y.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 647–806) da VCP humana; o anticorpo policlonal resultante pode reconhecer múltiplos epítopos e detectar tanto a VCP de comprimento total quanto fragmentos C-terminais. Para WB, espera-se uma banda em aproximadamente 89 kDa, mas é necessário validar no sistema de amostra utilizado.
• Observa-se reatividade cruzada com VCP humana, de camundongo e de rato. Ao utilizar amostras de roedores, confirme a reatividade e ajuste as condições conforme necessário.
• Para IHC-P e IF/ICC, otimize as condições de recuperação antigênica e permeabilização, pois a VCP está presente em vários compartimentos subcelulares (citoplasma, núcleo, RE).
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo pode ser utilizado tanto para detecção direta quanto como componente de um par de captura/detecção após validação.
• Como reagente policlonal, a consistência entre lotes pode variar; estabeleça controles apropriados para garantir a reprodutibilidade.

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