Anticorpo Policlonal Anti-Receptor de VEGF 2 para WB, ELISA - P35968

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de VEGF 2

• O Receptor de VEGF 2 (VEGFR2), também conhecido como KDR, FLK-1 ou CD309, é um receptor tirosina quinase transmembrana que serve como o principal mediador da angiogênese e permeabilidade vascular induzidas por VEGFA. Ele também se liga a VEGFC e VEGFD, desempenhando papéis essenciais no desenvolvimento vascular e na hematopoiese embrionária.
• Como um regulador chave da biologia das células endoteliais, o VEGFR2 promove proliferação, sobrevivência, migração e diferenciação de células endoteliais, sendo crítico para a reorganização do citoesqueleto de actina.
• A ativação do VEGFR2 desencadeia múltiplas cascatas de sinalização a jusante, incluindo a via MAPK/ERK, a via AKT1 e a mobilização de cálcio mediada por PLCG1. Ele também fosforila PIK3R1, NOS3, SRC e PTK2/FAK1, ligando-o à produção de óxido nítrico e à dinâmica das adesões focais.
• O gene humano KDR codifica várias isoformas. A isoforma 1 é o receptor de comprimento total, enquanto as isoformas que carecem do domínio transmembrana (isoformas 2 e 3) atuam como receptores isca solúveis, regulando negativamente a linfangiogênese ao sequestrar VEGFA e VEGFC.
• O VEGFR2 está predominantemente localizado na membrana celular, mas também é detectado nas junções celulares, no citoplasma, núcleo, retículo endoplasmático, endossomos iniciais e pode ser secretado, refletindo seus papéis dinâmicos no tráfego e sinalização.
• Amplamente expresso, é detectado no nível proteico na córnea e é extensivamente modificado pós-traducionalmente por fosforilação, glicosilação e ubiquitinação, conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 1150-1250 dentro do domínio intracelular C-terminal. Esta região é distante dos principais sítios de fosforilação conhecidos e deve ser acessível tanto em condições desnaturantes (WB) quanto nativas (ELISA). No entanto, verifique a disponibilidade do epítopo em seu sistema de amostra específico.
• O peso molecular previsto do VEGFR2 humano é de 151,5 kDa (UniProt) / 152 kDa (fornecedor), com a glicosilação potencial causando migração em massas aparentes mais altas. No WB, execute géis com porcentagem suficientemente alta e inclua marcadores de peso molecular apropriados para resolver o receptor maduro.
• Este anticorpo demonstra reatividade cruzada com o VEGFR2 de camundongo e rato, tornando-o adequado para estudos multi-espécies. Confirme a especificidade do alvo em seu organismo modelo por meio de controles de knockdown ou knockout, se possível.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo tanto como captura quanto como detecção em um formato sanduíche, se você o emparelhar com um monoclonal ou policlonal não competitivo produzido contra um epítopo diferente. Titulações em tabuleiro de xadrez são aconselháveis.
• Por se tratar de um anticorpo policlonal, pode ocorrer uma variação menor entre lotes. Inclua controles de referência interna para reprodutibilidade entre experimentos e valide qualquer novo lote antes do uso em grande escala.

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