Anticorpo policlonal anti-VEGFA para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P15692

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do VEGFA

• O VEGFA participa da indução de genes essenciais envolvidos na resposta à hipóxia e na indução da angiogênese, como o HIF1A. Referências relacionadas: PMID:35455969
• O VEGFA é um fator de crescimento ativo na angiogênese, vasculogênese e crescimento de células endoteliais. Ele induz a proliferação de células endoteliais, promove a migração celular, inibe a apoptose e induz a permeabilização dos vasos sanguíneos. Referências relacionadas: PMID:34530889
• O VEGFA liga-se aos receptores FLT1/VEGFR1 e KDR/VEGFR2, bem como ao NRP1/neuropilina-1. Uma isoforma liga-se ao receptor KDR, mas não ativa as vias de sinalização a jusante e inibe o crescimento tumoral.
• A proteína localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o citoplasma, o núcleo, o retículo endoplasmático e o aparelho de Golgi, sendo também secretada no espaço e na matriz extracelulares.
• O VEGFA é uma glicoproteína com afinidade de ligação à heparina e contém pontes dissulfeto, essenciais para sua integridade estrutural e função.
• O VEGFA é amplamente expresso, com maior expressão em tumores hipofisários em comparação com a hipófise normal. Algumas isoformas apresentam padrões de expressão restritos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 100-200 do VEGFA humano (NP_001165094.1). Devido ao splicing alternativo e à presença de múltiplas isoformas, considere confirmar a detecção da(s) isoforma(s) específica(s) relevante(s) para o seu estudo por meio de alinhamento de sequências.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 27 kDa; no entanto, a glicosilação e possíveis variações entre isoformas podem resultar em bandas adicionais. Utilize controles positivos e marcadores de peso molecular apropriados.
• Em IHC-P e IF/ICC, podem ser necessárias etapas de recuperação antigênica e permeabilização para permitir o acesso ao VEGFA em suas diversas localizações subcelulares. Otimize as condições de detecção para o seu tecido ou tipo celular.
• Para aplicações em ELISA, como anticorpo policlonal, ele pode proporcionar alta sensibilidade, mas também apresentar especificidade mais ampla. Em ensaios quantitativos, valide com curvas-padrão e considere utilizá-lo como reagente de captura ou detecção em um sistema de par combinado.
• A reatividade cruzada foi relatada para humanos, camundongos e ratos; entretanto, sempre valide na espécie e no sistema de amostra específicos de interesse, pois a conservação dos epítopos e os níveis de expressão podem variar.

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