Anticorpo Policlonal Anti-VEGFB para WB, IF/ICC, ELISA - P49765

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do VEGFB

• O fator de crescimento endotelial vascular B (VEGFB) é um fator de crescimento secretado que promove a proliferação e sobrevivência de células endoteliais, desempenhando um papel fundamental na angiogênese e homeostase vascular.
• O VEGFB existe como duas isoformas principais, VEGF-B167 e VEGF-B186, geradas por splicing alternativo; ambas as isoformas compartilham uma região N-terminal comum, mas diferem em seus domínios C-terminais.
• O VEGF-B167 se liga à heparina e à neuropilina-1 com alta afinidade, enquanto a ligação à neuropilina-1 do VEGF-B186 é regulada por processamento proteolítico.
• A proteína é classificada como uma glicoproteína com ligações dissulfeto, característica da família de fatores de crescimento VEGF/PDGF, e funciona como um mitógeno para células endoteliais.
• Subcelularmente, o VEGFB é secretado no espaço extracelular, onde pode interagir com receptores em células-alvo para ativar vias de sinalização a jusante.
• A análise de expressão tecidual revela que o VEGFB é amplamente expresso, com níveis mais altos no coração, músculo esquelético e pâncreas; está ausente no fígado.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para produzir este anticorpo abrange os aminoácidos 30-121 do VEGFB humano, uma região bem conservada entre as duas isoformas e entre espécies, o que pode contribuir para a reatividade cruzada observada com rato e rato.
• Para Western blot (WB), considere usar um tampão de amostra redutor e detectar uma banda em aproximadamente 22 kDa, correspondente à forma monomérica madura; no entanto, dímeros ou variantes glicosiladas também podem ser observados.
• A imunofluorescência (IF/ICC) pode exigir otimização das condições de fixação e permeabilização, pois o VEGFB é uma proteína secretada; a incubação com um inibidor de transporte de proteínas pode melhorar a coloração intracelular.
• O desempenho do ELISA deve ser validado com padrões de VEGFB recombinante apropriados e matrizes de amostra, pois o anticorpo é uma preparação policlonal e pode apresentar variabilidade de lote para lote.
• Sempre titula o anticorpo em seu sistema experimental específico para determinar a diluição de trabalho ideal e inclua controles positivos e negativos apropriados.

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