Anticorpo policlonal de coelho anti-VEGFR1 para WB, IHC-P, ELISA - P17948

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do VEGFR1

• O VEGFR1 (FLT-1) é um receptor tirosina-proteína quinase e membro da família VEGFR, codificado pelo gene FLT1. Ele existe como múltiplas isoformas, incluindo uma forma completa ligada à membrana e variantes solúveis secretadas (isoformas 2 e 3) geradas por splicing alternativo.
• Atua como um receptor de alta afinidade para VEGFA, VEGFB e PGF, regulando criticamente o desenvolvimento da vasculatura embrionária e a angiogênese pós-natal. Pode promover tanto a sobrevivência e a proliferação das células endoteliais quanto funcionar como um receptor chamariz, modulando negativamente a sinalização de VEGFA ao sequestrar o ligante livre.
• A ligação do ligante ativa múltiplas vias a jusante, incluindo as cascatas de sinalização PLCG-PKC, PI3K-AKT1 e MAPK. Fosforila mediadores importantes, como SRC, YES1, CBL e PTK2/FAK1, e induz a fosforilação de AKT1 em Ser-473. Referências relacionadas: PMID:16685275
• Subcelularmente, o VEGFR1 está predominantemente localizado na membrana plasmática, mas também é detectado em endossomos, no citoplasma e como isoformas secretadas, refletindo seu tráfego dinâmico e sua versatilidade na sinalização.
• É amplamente expresso em células endoteliais vasculares e em tecidos como placenta, fígado, rim, coração e cérebro. A isoforma 2 é abundante na placenta, enquanto a isoforma 3 é encontrada em células epiteliais da córnea e células musculares lisas vasculares.
• A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação ligada a N, formação de pontes dissulfeto e fosforilação, que são essenciais para sua função. As palavras-chave do UniProt destacam seus papéis na angiogênese, quimiotaxia e desenvolvimento.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região extracelular (aminoácidos 20-300) do VEGFR1 humano, sugerindo reatividade com isoformas ligadas à membrana e solúveis. Realize a validação adequada do epítopo em seu sistema experimental.
• Para Western blotting, o peso molecular esperado é de aproximadamente 151 kDa; no entanto, a glicosilação pode causar deslocamentos da banda. Valide a especificidade utilizando controles apropriados (por exemplo, peptídeo bloqueador ou lisados com knockdown).
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), são recomendados métodos robustos de recuperação antigênica para tecidos fixados em formalina e incluídos em parafina. Comece com protocolos padrão à base de citrato ou EDTA e otimize as condições de detecção.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção. Faça a titulação do anticorpo para determinar as concentrações de trabalho ideais e valide com pares de anticorpos complementares para formatos sanduíche.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo e rato, o anticorpo é adequado para estudos translacionais, mas confirme o desempenho específico para cada espécie utilizando controles positivos e negativos relevantes.

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