Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-VHL para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P40337

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do VHL

• VHL (supressor de tumores da doença de von Hippel-Lindau) é a subunidade de reconhecimento de substrato do complexo da ligase E3 ubiquitina VCB-Cul2, visando proteínas para degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:10944113 PMID:17981124 PMID:19584355

• Sob condições normóxicas, o VHL reconhece especificamente subunidades alfa do fator indutível por hipóxia (HIF-α) hidroxiladas, levando à degradação dependente de ubiquitina e repressão dos programas transcricionais mediados pelo HIF. Referências relacionadas: PMID:10944113 PMID:17981124

• O VHL também ubiquitina e promove a degradação de substratos alternativos, incluindo ADRB2 e o andaime mTORC1 RPTOR, regulando negativamente a sinalização mTORC1. Referências relacionadas: PMID:19584355 PMID:34290272

• A proteína localiza-se dinamicamente no citoplasma, núcleo, membrana celular e retículo endoplasmático, permitindo a sua participação em múltiplas vias de sinalização e regulação espacial da ubiquitinação.

• O VHL é predominantemente expresso no cérebro e rim de adultos e fetos — tecidos suscetíveis à tumorigênese upon perda de VHL — destacando o seu papel de supressor de tumores específico do tecido.

• O gene VHL produz múltiplas isoformas (incluindo pVHL e G7) através de splicing alternativo e iniciação de tradução alternativa, que podem exibir propriedades funcionais distintas.

• Como um supressor de tumores bem estabelecido, a inativação bialélica do VHL leva à ativação constitutiva do HIF e é o evento impulsionador na doença de von Hippel-Lindau e no carcinoma renal de células claras esporádico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• A região do imunógeno (aminoácidos 1–100 do VHL humano) sugere que o anticorpo reconhece o terminal N; considere o mapeamento de epítopos se forem necessárias informações precisas de ligação.
• No western blotting (WB), espere uma banda principal próxima de 24 kDa; isoformas alternativas ou modificações pós-traducionais podem produzir bandas adicionais.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), as condições de recuperação de antígeno e os protocolos de fixação devem ser otimizados para o tecido ou tipo celular de interesse.
• O anticorpo reage cruzadamente com VHL de camundongo e rato; valide no modelo de espécie relevante antes de ensaios quantitativos.
• Para aplicações de ELISA, emparelhe com um anticorpo de captura ou use como reagente de detecção após confirmar a compatibilidade com o formato do ensaio.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência de lote para lote deve ser verificada através de lisados de controle positivo ou proteína recombinante.

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