Anticorpo monoclonal anti-βIII-Tubulina (TUBB3) para WB, IP, IF, IHC, ELISA - Q13509

Especificações e parâmetros essenciais do produto

Contexto biológico: função e localização da βIII-Tubulina (TUBB3)

• A βIII-Tubulina (TUBB3) é uma isoforma de beta-tubulina de classe III específica de neurônios que se organiza em microtúbulos, os filamentos essenciais do citoesqueleto compostos por heterodímeros de alfa- e beta-tubulina.
  Referências relacionadas: PMID:34996871, PMID:38305685, PMID:38609661
• A TUBB3 desempenha um papel crítico na orientação e manutenção dos axônios, direcionando a dinâmica adequada dos cones de crescimento em neurônios em desenvolvimento.
  Referências relacionadas: PMID:20074521
• A ligação do sinalizador de orientação netrina-1 (NTN1) ao seu receptor UNC5C desencadeia a dissociação de UNC5C da TUBB3 polimerizada nos microtúbulos, aumentando a dinâmica dos microtúbulos e mediando a repulsão axonal.
  Referências relacionadas: PMID:28483977
• Durante o desenvolvimento do gânglio da raiz dorsal (DRG), a TUBB3 contribui para a projeção dos axônios sensoriais em direção à medula espinhal, um processo regulado pela sinalização netrina-1/UNC5C.
  Referências relacionadas: PMID:28483977
• Subcelularmente, a TUBB3 está localizada no citoplasma e se concentra em protrusões celulares dinâmicas, como cones de crescimento, lamelipódios e filopódios.
• A expressão de TUBB3 é normalmente restrita aos sistemas nervosos central e periférico, mas é significativamente aumentada na maioria dos tecidos cancerosos, tornando-a um biomarcador de câncer.
• A proteína sofre diversas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, e está sujeita a splicing alternativo; mutações associadas a doenças na TUBB3 estão relacionadas à deficiência intelectual e à fibrose congênita dos músculos extraoculares (CFEOM).

Orientação experimental e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo localizado entre os aminoácidos 351–450, abrangendo uma região C-terminal exclusiva da βIII-tubulina; isso pode proporcionar especificidade de isoforma em relação a outros membros da família das beta-tubulinas.
• Para Western blotting, espera-se uma única banda próxima de 50 kDa; considere utilizar controles de validação por knockout para confirmar a identificação da banda.
• O anticorpo é aplicável à imunofluorescência (IF-P) e à imuno-histoquímica (IHC-P); as condições ideais de fixação e permeabilização devem ser determinadas empiricamente para cada tipo de amostra, pois os antígenos dos microtúbulos podem ser sensíveis à fixação excessiva.
• Para imunoprecipitação, o formato monoclonal de coelho oferece alta afinidade e baixo background; recomenda-se o pré-clareamento dos lisados e o uso de condições brandas de detergente.
• A reatividade cruzada com camundongo permite que o anticorpo seja utilizado em modelos comuns de camundongo em neurobiologia e câncer; valide-o no sistema de tecido ou linhagem celular relevante.

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