Anticorpo Monoclonal Anti-Villina1 para WB, IHC-P, ELISA - P09327

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Villin1

• Villina-1 (VIL, D2S1471) é uma proteína modificadora de actina regulada por Ca2+ específica de células epiteliais que modula a reorganização da actina nas microvilosidades.
• Ela apresenta múltiplas atividades reguladoras da actina, incluindo nucleação, agregação, capagem e clivagem, reguladas pela ligação de Ca2+, PIP2 e LPA.
• A ligação ao LPA aumenta a fosforilação mediada por SRC e inibe as atividades modificadoras da actina, enquanto o PIP2 inibe a capagem/clivagem, mas promove a agregação.
• A Villina-1 regula a morfologia, migração, invasão e apoptose de células epiteliais; protege contra a apoptose induzida por DSS ao preservar a integridade mitocondrial.
• Aumenta a motilidade celular epitelial induzida por HGF, a quimiotaxia e o reparo de feridas.
• Durante a infecção por S. flexneri, sua atividade de clivagem da actina facilita o movimento intracelular e a disseminação da bactéria.
• Subcelularmente, está localizada no citoplasma, citoesqueleto e projeções ricas em actina: pontas de microvilosidades, lamelipódios, dobras e filopódios.
• Especificidade tecidual: é o principal componente das microvilosidades nos epitélios do túbulo proximal intestinal e renal; também é expressa nas microvilosidades canaliculares dos hepatócitos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante de Villin1 humana; o anticorpo monoclonal resultante pode reconhecer epítopos lineares e conformacionais, suportando aplicações desnaturantes (WB) e nativas (IHC, ELISA).
• Para Western blot, recomenda-se SDS-PAGE redutor; espera-se uma banda principal de aproximadamente 93 kDa. Valide a especificidade usando controles positivos (por exemplo, lisados de células epiteliais intestinais ou renais) e linhagens celulares de controle negativo.
• Para imunohistoquímica em seções de parafina, métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0) podem ser necessários; valide em tecidos com alta expressão de Villin1, como intestino delgado ou rim.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com Villin1 de camundongo e rato, permitindo seu uso em modelos de roedores; confirme a reatividade específica da espécie comparando com padrões de expressão conhecidos.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção com Villin1 recombinante ou extratos de células/tecidos; pareie com um anticorpo anti-Villin1 não sobreposto, se disponível.

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