Anti-Vinculin [Validado por KD] Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P18206

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Vinculina

• A Vinculina é uma proteína de ligação a filamentos de actina (F-actina) codificada pelo gene VCL; uma isoforma específica do músculo, metavinculina (MV), é gerada por splicing alternativo.
• É essencial tanto para a adesão célula-matriz quanto para a adesão célula-célula, regulando a expressão de E-caderina na superfície celular e aprimorando a mecanossensação pelo complexo de E-caderina.
• A Vinculina se localiza em múltiplas estruturas subcelulares, incluindo junções aderentes, adesões focais, o citoesqueleto, sarcolema, podossomos e o citoplasma perinuclear.
• A proteína está sujeita a acetilação, fosforilação e palmitoilção, que provavelmente modulam sua atividade e associação com a membrana.
• Variantes da doença no VCL estão associadas a cardiomiopatias; a metavinculina está especificamente implicada em distúrbios musculares, como cardiomiopatia dilatada (CMD1W) e cardiomiopatia hipertrófica (CMH15).
• A Vinculina desempenha papéis na morfologia e locomoção celular, contribuindo para a remodelagem dinâmica do citoesqueleto de actina durante a migração.
• Estudos estruturais indicam que a vinculina contém domínios repetitivos que permitem interações com múltiplos parceiros de ligação, servindo como um andaime molecular em locais de adesão.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1–258 da vinculina humana (região N-terminal); portanto, o anticorpo pode detectar a vinculina de comprimento total (~124 kDa) e a isoforma metavinculina (~150 kDa) em amostras musculares.
• Para Western blotting, recomendamos executar marcadores de tamanho apropriados e controles de carga; considere o uso de lisados de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato que expressem vinculina. A validação por KD confirma a especificidade, mas os usuários finais devem verificar em seu próprio sistema experimental.
• Em imunofluorescência e imuno-histoquímica, a vinculina geralmente aparece como pontos distintos nas adesões focais e faixas contínuas nas junções célula-célula. Inclua controles negativos (por exemplo, células com knockdown de vinculina) e co-coloração com marcadores de adesão para confirmar a localização.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado tanto em formato direto quanto em sanduíche; otimize as concentrações de revestimento e as condições de detecção empiricamente.

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