Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Vinculina para WB, IF/ICC, ELISA - P18206

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Vinculina

• A Vinculina é uma proteína de ligação a filamentos de actina (F-actina) crucial para a adesão célula-matriz e adesão célula-célula, regulando a expressão superficial da E-caderina e potencializando a mecano-sensibilidade.
• Uma variante de splicing específica do músculo, a metavinculina, é gerada a partir do gene VCL e desempenha funções especializadas no músculo cardíaco e esquelético.
• A Vinculina localiza-se em adesões focais, junções de aderência, podossomos e na região perinuclear, ligando o citoesqueleto de actina à membrana plasmática através da associação com o sarcolema.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo palmitoilação e fosforilação, que acredita-se regularem suas funções adesivas e a interação com parceiros de ligação.
• Ao fazer a ponte entre os locais de adesão e a rede de actina, a vinculina influencia a morfologia e a locomoção celular, processos essenciais para a cicatrização de feridas e o desenvolvimento.
• Mutações no gene VCL estão associadas a cardiomiopatias hereditárias, destacando seu papel crítico na manutenção da integridade do músculo cardíaco.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, o peso molecular esperado é de aproximadamente 124 kDa para a vinculina; uma banda mais alta em torno de 150 kDa correspondente à metavinculina pode ser detectada em amostras de músculo.
• Ao realizar imunofluorescência ou imunocitoquímica, permeabilize as células para visualizar a vinculina nas adesões focais; a fixação com paraformaldeído geralmente é adequada.
• Valide a especificidade do anticorpo em seu sistema de amostra usando controles de nocaute (knockout) ou silenciamento (knockdown) sempre que possível.
• Para aplicações de ELISA, considere otimizar o tampão de revestimento e as condições de detecção para se adequar ao formato específico do imunoensaio.

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