Anticorpo policlonal anti-VIPR1 para WB, ELISA - P32241

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do VIPR1

• O receptor 1 do polipeptídeo intestinal vasoativo (VIPR1), também conhecido como receptor VPAC1 ou receptor do tipo II do PACAP, é um receptor acoplado à proteína G ativado pelos neuropeptídeos peptídeo intestinal vasoativo (VIP) e polipeptídeo ativador da adenilato ciclase da hipófise (PACAP). Liga-se ao VIP e ao PACAP27 com alta afinidade e, em menor grau, ao PACAP38, levando à ativação da via de sinalização dependente de cAMP.
  Referências relacionadas:
  PMID:35477937
  PMID:36385145
  PMID:8179610
• O gene VIPR1 gera múltiplas isoformas por meio de splicing alternativo, contribuindo para a diversidade funcional.
• O VIPR1 está localizado predominantemente na membrana celular e pertence à família de GPCRs semelhantes à rodopsina da classe A, caracterizada por sete hélices transmembranares.
• Os principais motivos estruturais incluem ligações dissulfeto e sítios de glicosilação ligados a N, que são essenciais para o dobramento, o tráfego e a ligação ao ligante do receptor.
• Expressão tecidual: altamente expresso no pulmão, nas células epiteliais colônicas HT-29 e nos linfoblastos B Raji; expressão moderada no cérebro, coração, rim, fígado e placenta; não detectado em células T CD4+ ou CD8+, mas presente em determinadas linhagens de células T (HARRIS, HuT 78, Jurkat, SUP-T1).
• O VIPR1 medeia diversos processos fisiológicos, incluindo o relaxamento da musculatura lisa, a modulação imune e a regulação do ritmo circadiano, por meio do acoplamento à proteína G e da ativação da adenilato ciclase.
• O receptor foi caracterizado estruturalmente (estrutura 3D) e está sujeito a modificações pós-traducionais, como clivagem proteolítica (peptídeo-sinal) e glicosilação.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (aa 31–150) corresponde ao domínio extracelular N-terminal do VIPR1; considere que o anticorpo pode reconhecer o receptor tanto em sua conformação nativa quanto em condições desnaturantes.
• Para Western Blot, valide o anticorpo em condições redutoras e não redutoras devido à presença de ligações dissulfeto, que podem influenciar a mobilidade eletroforética. O peso molecular previsto é de aproximadamente 52 kDa (UniProt: 51,5 kDa), mas a glicosilação pode causar alterações na posição das bandas.
• No ELISA, utilize a proteína recombinante (aa 31–150) ou um padrão peptídico para confirmar a especificidade e titule o anticorpo para estabelecer as concentrações de trabalho ideais.
• A reatividade cruzada foi confirmada para o VIPR1 humano; a reatividade com outras espécies ou receptores estreitamente relacionados (por exemplo, VIPR2) deve ser avaliada se os modelos experimentais forem diferentes.

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