Anticorpo policlonal de coelho anti-fator de von Willebrand (VWF) para WB/IHC-P/ELISA - P04275

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do fator de von Willebrand

• O fator de von Willebrand (VWF) é uma glicoproteína plasmática multimérica essencial para a hemostasia, atuando como uma ponte molecular entre o colágeno subendotelial e o receptor plaquetário GPIb-IX-V, promovendo a adesão das plaquetas nos locais de lesão vascular.
• O VWF também atua como uma chaperona para o fator VIII da coagulação, estabilizando sua estrutura heterodimérica e protegendo-o da depuração prematura do plasma.
• Codificada pelo gene VWF (GeneID: 7450) no cromossomo 12, a proteína é sintetizada como uma pré-pró-proteína de 2813 aminoácidos que passa por um extenso processamento pós-traducional, incluindo glicosilação e multimerização.
• A proteína é secretada e se localiza no espaço extracelular, onde faz parte da matriz extracelular e circula no plasma.
• O VWF contém vários domínios funcionais, incluindo domínios A que mediam interações com a glicoproteína plaquetária Ib e o colágeno.
• Mutações no gene VWF estão associadas à doença de von Willebrand (VWD), um distúrbio hemorrágico caracterizado por adesão plaquetária defeituosa e níveis reduzidos do fator VIII.
• O splicing alternativo do transcrito de VWF gera múltiplas isoformas, embora o significado funcional de muitas variantes ainda esteja sob investigação.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 2645-2813, uma região C-terminal do VWF. Essa sequência pode detectar todas as principais isoformas em aplicações de Western blot desnaturante (WB).
• Para IHC-P, os métodos de recuperação antigênica e a diluição do anticorpo devem ser otimizados, pois o VWF é abundantemente expresso no endotélio vascular e nas plaquetas.
• No ELISA, considere combinar este anticorpo policlonal com um anticorpo de captura direcionado a um epítopo não sobreposto para evitar competição.
• Devido ao alto peso molecular (309 kDa) do VWF maduro, use géis de SDS-PAGE com baixa concentração (5–6%) e tempos de transferência prolongados para garantir uma detecção eficiente.
• Devido à natureza multimérica do VWF, recomenda-se o uso de agentes redutores (por exemplo, DTT) para resolver as formas monoméricas no WB; condições não redutoras podem revelar padrões multiméricos em escada.

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