Anticorpo Policlonel Coelho Anti-VPS35 para WB, ELISA - Q96QK1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da VPS35

• A VPS35 (proteína associada à organização de proteínas vacuolares 35) é um componente central do complexo seletor de carga do retromero (CSC), essencial para impedir a degradação lisossomal de proteínas de carga transmembrana selecionadas; é necessária para o transporte retrógrado de IGF2R e SLC11A2 dos endossomos para a TGN e para a transcitose de pIgR-pIgA. Referências relacionadas: PMID:15078903, PMID:15247922, PMID:20164305
• O CSC do retromero interage com nexinas de organização distintas (SNX3, SNX27, SNX-BAR) para definir vias de tráfego especializadas; por exemplo, o retromero SNX3 media o transporte retrógrado endossomo-TGN do WLS. Referências relacionadas: PMID:30213940
• A VPS35 facilita o recrutamento do complexo WASH e da TBC1D5 para as membranas endossomais, ligando a função do retromero à polimerização de actina e ao ciclo de proteínas regulatórias. Referências relacionadas: PMID:22070227, PMID:28892079, PMID:20923837
• A localização subcelular inclui o citoplasma, a membrana e os compartimentos endossomais (endossomos precoces e tardios), o que é consistente com seu papel no tráfego intracelular.
• As modificações pós-traducionais incluem a fosforilação (palavra-chave "Fosfoproteína"), sugerindo um controle regulatório da montagem do retromero e da organização de carga.
• A expressão tecidual é ubíqua, com níveis elevados no coração, cérebro, placenta, músculo esquelético, baço, timo, testículo, ovário, intestino delgado, rim e cólon.
• Mutações na VPS35 estão associadas à doença de Parkinson de início tardio autossômica dominante (PARK17), implicando a disfunção do retromero na neurodegeneração.
• Além disso, a VPS35 desempenha um papel nas interações hospedeiro-vírus; o CSC do retromero media a saída do papilomavírus humano dos endossomos precoces durante a infecção.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1-250) da VPS35 humana, que é altamente conservada; a reatividade cruzada com camundongo foi confirmada, e a reatividade com outras espécies é possível devido à homologia de sequência.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 92 kDa. Devido à expressão ubíqua da proteína, podem ser antecipados sinais positivos em vários lisados de células humanas e murinas (por exemplo, HeLa, HEK293 ou tecido cerebral de camundongo); valide no seu sistema de amostra específico.
• Em ELISA, considere usar tanto a cobertura direta de VPS35 recombinante quanto ensaios de captura; titule o anticorpo para estabelecer as diluições de trabalho ideais.
• Para imunofluorescência ou imuno-histoquímica, observe que este é um anticorpo policlonal; validação adicional pode ser necessária devido à possível reatividade cruzada com outros membros da família VPS ou componentes do retromero.
• Armazene a -20°C em alíquotas e evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento para manter a atividade.

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