Anticorpo Monoclonal Anti-WEE1 para IHC-P, ELISA - P30291

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da WEE1

• WEE1 (proteína quinase semelhante à Wee1) é uma tirosina quinase nuclear que atua como um regulador negativo essencial da transição do ciclo celular G2/M, fosforilando e inibindo o complexo ciclina B1-CDK1.
  Referências relacionadas: PMID:15070733, PMID:7743995, PMID:8348613, PMID:8428596
• Ela fosforila especificamente a CDK1 na tirosina-15, impedindo a entrada prematura na mitose; sua atividade atinge o pico durante as fases S e G2 e diminui à medida que as células entram em mitose, correlacionando-se com sua hiperfosforilação e subsequente degradação.
• A WEE1 localiza-se principalmente no núcleo, onde protege o genoma ao garantir o momento adequado da entrada na mitose.
• A proteína contém domínios conservados de quinase, ligação ao ATP e ligação a metais, típicos das tirosina quinases, e sua atividade é modulada por fosforilação e ubiquitinação.
• Os nomes alternativos da WEE1 incluem WEE1A, WEE1hu e quinase Wee1A; o identificador do gene humano é 7465.
• As palavras-chave do UniProt associadas à WEE1 abrangem ciclo celular, mitose, núcleo, quinase, fosfoproteína, splicing alternativo e conjugação de ubiquitina, refletindo suas funções regulatórias.
• A proteína WEE1 humana tem um peso molecular previsto de aproximadamente 71,6 kDa (UniProt), consistente com o produto de 72 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 1-100 da WEE1 humana (NP_003381.1). Essa região N-terminal pode ser adequada para detectar tanto a proteína completa quanto variantes de splicing, mas recomenda-se a validação no sistema de amostra relevante.
• Para aplicações de IHC-P, considere testar uma faixa de diluições do anticorpo e métodos de recuperação antigênica, pois se espera um padrão de coloração nuclear; a reatividade cruzada do anticorpo com a WEE1 de camundongo pode facilitar estudos em modelos murinos.
• Para ELISA, recomenda-se otimizar o antígeno de revestimento e as condições de detecção; a combinação com um anticorpo de captura ou detecção adequado pode aumentar a sensibilidade do ensaio.
• Como os níveis da proteína WEE1 flutuam durante o ciclo celular, a sincronização das culturas celulares e o momento adequado da coleta das amostras podem melhorar a consistência da detecção.

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