Anticorpo policlonal de coelho anti-WNK3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9BYP7

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do WNK3

• WNK3 (proteína-quinase 3 deficiente em lisina) é uma serina/treonina-proteína quinase codificada pelo gene WNK3 (também conhecido como KIAA1566, PRKWNK3), pertencente à família de quinases WNK.
• É um componente-chave da cascata de quinases WNK3-SPAK/OSR1, que regula a homeostase eletrolítica e a recuperação do volume celular durante o estresse hiperosmótico. Referências relacionadas: PMID:16275911, PMID:16275913, PMID:16501604
• Após o encolhimento celular, o WNK3 atua como um sensor de aglomeração molecular e sofre separação de fases líquido-líquido, formando condensados sem membrana que concentram seus substratos. Referências relacionadas: PMID:36318922
• Dentro desses condensados, o WNK3 fosforila e ativa as quinases downstream OXSR1/OSR1 e STK39/SPAK, que, por sua vez, modulam os cotransportadores de íons (NKCCs, NCC e KCCs) para controlar o influxo/efluxo de íons. Referências relacionadas: PMID:22989884, PMID:16275911, PMID:16275913, PMID:16357011
• O WNK3 localiza-se no citoplasma e apresenta expressão específica de tecido, com níveis elevados no cérebro, pulmão, rim, fígado e pâncreas, além de isoformas distintas no cérebro (isoforma 1) e no rim (isoforma 3).
• Além de sua atividade quinase, o WNK3 atua como uma proteína de suporte que regula negativamente a localização na membrana de transportadores como KCNJ1 e SLC26A9, além de aumentar o influxo de cálcio por meio de TRPV5/TRPV6. Referências relacionadas: PMID:16357011, PMID:17673510, PMID:18768590

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 500–600 do WNK3 humano, fornecendo uma região-alvo para a geração de anticorpos; considere verificar a especificidade utilizando controles de knockout ou knockdown.
• Para Western blotting, observe que o WNK3 tem um peso molecular previsto de aproximadamente 198 kDa; otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular (por exemplo, menor concentração de metanol no tampão de transferência e tempos de transferência mais longos).
• Em experimentos de imunofluorescência/ICC, valide os protocolos de fixação e permeabilização, pois o WNK3 é uma proteína citoplasmática; inclua controles apropriados para confirmar a localização subcelular.
• Para aplicações de ELISA, avalie o desempenho do anticorpo tanto como reagente de captura quanto de detecção; a reatividade cruzada com WNK3 de camundongo e rato sugere epítopos conservados, mas verifique sempre no contexto da espécie relevante.

CamelBio: sua ponte completa para fornecimento

A CamelBio é uma fornecedora completa de matérias-primas para IVD, apoiando fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa desde o conceito até a aplicação clínica. Nosso anticorpo policlonal de coelho contra WNK3 auxilia no estudo do equilíbrio eletrolítico e da regulação do volume celular. Fornecemos pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais, reagentes auxiliares a granel e fornecimento de alvos raros para simplificar o desenvolvimento de seus ensaios.