Anticorpo Policlonal Anti-WRN de Coelho para WB, ELISA - Q14191

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da WRN

• WRN codifica uma enzima multifuncional com atividade de helicase de DNA 3'–5' dependente de magnésio e ATP em substratos parcialmente duplos e atividade de exonuclease 3'–5' em dsDNA com uma extremidade 5' saliente (sem atividade em ssDNA ou dsDNA rombudo). Referências relacionadas: PMID:9224595, PMID:9288107, PMID:9611231, PMID:11863428
• A proteína liga-se e desenrola preferencialmente estruturas secundárias alternativas de DNA, como forquilhas de replicação, junções de Holliday e DNA G-quádruplex (ex.: repetições d(CGG)n), facilitando a progressão da forquilha de replicação e prevenindo a instabilidade do genoma. Referências relacionadas: PMID:10212265
• WRN é crítica para o reparo de quebras de fita dupla de DNA após gama-irradiação e para a formação de centros focais de replicação de DNA; sua depleção leva a quebras cromossômicas e severa instabilidade genômica. Referências relacionadas: PMID:9224595, PMID:9288107, PMID:9611231, PMID:33199508
• A proteína localiza-se predominantemente no núcleo, incluindo o nucléolo, o nucleoplasma e regiões cromossômicas, consistente com suas funções no metabolismo do DNA.
• WRN sofre múltiplas modificações pós-traducionais (acetilação, fosforilação, ubiquitinação) que provavelmente regulam suas atividades de helicase/exonuclease e interações proteína-proteína.
• Mutações em WRN causam a síndrome de Werner, um distúrbio autossômico recessivo de envelhecimento prematuro caracterizado por instabilidade genômica e predisposição ao câncer.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 1223–1432) reside na região C‑terminal fora do domínio conservado da helicase, potencialmente reduzindo a reatividade cruzada com outros membros da família RecQ.
• Para Western blotting, espere uma banda próxima a 162 kDa; use um marcador de alto peso molecular e um gel de baixa porcentagem (ex.: SDS-PAGE a 6%) para separação ideal.
• Valide a especificidade do anticorpo em linhagens celulares humanas relevantes (ex.: HeLa, HEK293) usando um controle de knockdown ou um lisado positivo conhecido.
• No ELISA, otimize o recobrimento com o imunógeno recombinante ou a proteína WRN de comprimento total, e considere um formato competitivo para maior especificidade.

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