Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-WT1 para WB, IHC-P, ELISA - P19544

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do WT1

• WT1 (Proteína do tumor de Wilms 1, também conhecida como WT33) é um fator de transcrição com múltiplos isoformas gerados por splicing alternativo, incluindo as variantes com inserção KTS. A proteína contém quatro domínios de dedo de zinco C-terminal que medeiam a ligação ao DNA.
• Reconhece a sequência de consenso de DNA 5'-GCG(T/G)GGGCG-3' e regula genes alvo como EPO, desempenhando um papel crítico no desenvolvimento do sistema urogenital. Referências relacionadas: PMID:7862533 PMID:17716689 PMID:25258363
• O WT1 exibe papéis duais dependentes do contexto como supressor tumoral e oncogene em vários cânceres, com funções específicas por isoforma.
• Isoformas que carecem do motivo KTS funcionam principalmente como fatores de transcrição, enquanto as isoformas contendo KTS podem interagir com mRNA e participar do metabolismo ou splicing do mRNA. Referências relacionadas: PMID:15520190 PMID:16934801 PMID:19123921
• A localização subcelular inclui núcleo, nucléolo, nucleoplasma, manchas nucleares e citoplasma, refletindo seus diversos papéis funcionais.
• Expresso predominantemente no rim e em um subconjunto de células hematopoiéticas, consistente com seu envolvimento no desenvolvimento e malignidades renais e hematológicas.
• Modificações pós-traducionais incluem ubiquitinação (conjugação Ubl) e coordenação de íons metálicos pelos domínios de dedo de zinco, que são essenciais para a ligação ao DNA e atividade transcricional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 60–250 do WT1 humano, cobrindo o domínio regulatório N-terminal a montante da região do dedo de zinco. Este projeto pode favorecer o reconhecimento de isoformas ou estados de ativação específicos; valide o padrão de reatividade no seu contexto experimental.
• O peso molecular previsto é de aproximadamente 49 kDa; confirme o tamanho da banda por WB em lisados relevantes (por exemplo, linhas celulares renais) e considere possíveis modificações pós-traducionais que possam causar deslocamentos.
• Para IHC-P, os protocolos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) devem ser otimizados, e a expressão em tecidos renais, testiculares ou tumorais pode servir como controles positivos.
• O anticorpo reage de forma cruzada com o WT1 de camundongo e rato, permitindo estudos translacionais em modelos de roedores; no entanto, a validação em cada espécie é recomendada.
• Para aplicações de ELISA, recomenda-se o emparelhamento com um anticorpo de detecção que tenha como alvo um epítopo não sobreposto para garantir a especificidade do ensaio.

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