Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-WWP2 para WB e ELISA - O00308

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do WWP2

• O WWP2, também conhecido como ligase de ubiquitina-proteína E3 tipo NEDD4 WWP2, proteína 2 de interação com Atrofina-1 (AIP2) ou proteína contendo domínio WW 2, é umembro da família de ligases de ubiquitina E3 tipo HECT. O gene sofre splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas.
• Funciona como uma ligase de ubiquitina E3, aceitando ubiquitina de uma enzima E2 e transferindo-a para substratos específicos. Catalisa a poliubiquitinação via ligações Lys-63, visando predominantemente substratos para degradação proteossomal.
• Em células-tronco embrionárias, o WWP2 ubiquitina e promove a degradação do fator de pluripotência POU5F1 (OCT4), contribuindo assim para a regulação da manutenção e diferenciação de células-tronco.
• Também ubiquitina o EGR2 em células T, levando à sua degradação proteossomal e inibição da morte celular induzida por ativação, destacando um papel na regulação imunológica.
• Localiza-se principalmente no núcleo, consistente com a sua função na regulação de fatores de transcrição nucleares e proteínas associadas à cromatina.
• Detetado numa vasta gama de tecidos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo, rim, pâncreas, baço e leucócitos de sangue periférico.
• Classificado como uma fosfoproteína e envolvido em interações hospedeiro-vírus, sublinhando a sua complexidade regulatória.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde à região interna (aa 151-400) do WWP2 humano, abrangendo parte do domínio catalítico HECT. Este design pode facilitar a deteção de formas de comprimento total e certas isoformas truncadas ou com splicing alternativo em Western blot.
• Para análise de Western blot, otimize a diluição do anticorpo (por exemplo, 1:500–1:2000) e as condições de incubação usando lisados de controlo positivo apropriados (por exemplo, linhagens de células humanas que expressam WWP2).
• Dado que este é um anticorpo policlonal, pode existir variabilidade entre lotes; inclua controlos apropriados, como proteína recombinante ou lisados de knockdown/knockout por siRNA, para confirmar a especificidade.
• Em aplicações de ELISA, considere usar o imunogénio recombinante ou proteína purificada como antigénio de revestimento e titule o anticorpo para estabelecer rácios ótimos de sinal-ruído.
• A reatividade cruzada é confirmada para humano; a reatividade com outras espécies não foi testada e deve ser validada se necessário para o seu sistema experimental.

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