Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-XIAP (Validado por KO) para WB, ELISA - P98170

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do XIAP

• XIAP (inibidor ligado ao X da apoptose), também conhecido como BIRC4, IAP3 ou hILP, é um membro da família de inibidores de apoptose (IAP), caracterizado por três domínios de repetição IAP baculoviral (BIR) e um domínio de dedo de zinco do tipo RING na extremidade C-terminal.
• Atua como um inibidor direto e potente de caspases; liga-se aos bolsos do sítio ativo do CASP3 e CASP7, obstruindo a entrada do substrato, e mantém o CASP9 em um estado monomérico inativo, bloqueando assim a apoptose. Referências relacionadas: PMID:11257230 PMID:11257231 PMID:12620238 PMID:16352606
• Funciona como uma ligase E3 de ubiquitinação de proteínas, mediando tanto a ubiquitinação degradativa quanto não degradativa (incluindo cadeias ligadas a Lys-63) de alvos como RIPK1, RIPK2, DIABLO/SMAC e MAP3K2/MEKK2, modulando assim as vias de sinalização NF-kB e MAP quinase. Referências relacionadas: PMID:17560374 PMID:17967870 PMID:19473982
• Regula a imunidade inata catalisando a poliubiquitinação ligada a Lys-63 de RIPK2 a jusante de NOD1 e NOD2, transformando o RIPK2 em uma plataforma de andaime para o complexo LUBAC e ativação a jusante de NF-kB e MAP quinase. Referências relacionadas: PMID:19667203 PMID:22607974 PMID:29452636
• Envolvido na homeostase de cobre através da ubiquitinação e degradação proteassomal de COMMD1, e aumenta a atividade de chaperona do CCS em direção ao SOD1. Referências relacionadas: PMID:14685266 PMID:20154138
• Atua como um regulador positivo da sinalização Wnt ao ubiquitinar corepressores de transcrição TLE (TLE1-4) e AES, o que alivia a repressão na transcrição mediada por TCF/LEF e permite a formação do complexo beta-catenina/TCF4. Referências relacionadas: PMID:22304967
• Suprime a formação do ripoptossoma ao ubiquitinar RIPK1 e CASP8, protegendo assim as células da morte celular necroptótica dependente e independente de caspases. Referências relacionadas: PMID:22095281
• Expresso onipresentemente nos tecidos, mas ausente nos leucócitos de sangue periférico; detectado em criptas colônicas em nível proteico. Referências relacionadas: PMID:8654366 PMID:30389919
• Localiza-se subcelularmente tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus diversos papéis funcionais na apoptose, sinalização e transcrição.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 1-200 do XIAP humano) cobre a região N-terminal contendo os domínios BIR. Esta região é crítica para a interação do XIAP com caspases e outros parceiros de ligação; portanto, o anticorpo pode reconhecer epítopos essenciais para estudos funcionais.
• Para Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 57 kDa com base no peso molecular previsto do XIAP. No entanto, devido a potenciais modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação, ubiquitinação) ou produtos de clivagem, bandas adicionais podem ser observadas; valide no seu sistema de amostra.
• Este anticorpo foi relatado como reativo com XIAP humano, de camundongo e de rato pelo fabricante. Para aplicações entre espécies (por exemplo, amostras de camundongo ou rato), verifique a reatividade e especificidade sob suas condições experimentais.
• O anticorpo é validado por KO, indicando alta probabilidade de especificidade. Ainda assim, inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados de knockout de XIAP) em seus ensaios.
• Para ELISA, otimize a concentração do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo; o imunógeno é uma proteína recombinante, então considere usar uma proteína recombinante semelhante como controle positivo.

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