Anticorpo Monoclonal Anti-XPD/ERCC2 para WB, IHC-P, ELISA - P18074

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do XPD/ERCC2

• A proteína XPD/ERCC2 é uma helicase de DNA 5'-3' dependente de ATP que é um componente central do fator geral de transcrição e reparo de DNA IIH (complexo TFIIH), desempenhando um papel crítico no reparo de excisão de nucleotídeos (NER) e na iniciação da transcrição. Referências relacionadas: PMID:31253769, PMID:8413672, PMID:9771713
• No NER acoplado à transcrição, o XPD/ERCC2 reconhece bases de DNA danificadas e é sequestrado na cromatina no DNA danificado por UV; a atividade de helicase dependente de ATP é essencial para a abertura do DNA ao redor da lesão. Referências relacionadas: PMID:17466626, PMID:23352696, PMID:9771713
• Durante a iniciação da transcrição pela RNA polimerase II, o XPD/ERCC2 atua como uma ponte estrutural entre o módulo da quinase ativadora de CDK (CA) e o complexo central-TFIIH, e sua atividade de helicase é necessária para a abertura do promotor e escape; grandes mudanças conformacionais ocorrem entre os complexos de NER e transcrição. Referências relacionadas: PMID:10024882, PMID:31253769, PMID:33902107, PMID:1746662626
• Além de seus papéis no reparo de DNA e transcrição, o XPD/ERCC2 participa da segregação cromossômica como parte do complexo MMXD associado ao fuso mitótico e regula a atividade do receptor de vitamina D.
• A localização subcelular inclui o núcleo, citoplasma e citoesqueleto (fuso), consistente com seus papéis na transcrição, reparo de DNA e mitose.
• O XPD/ERCC2 contém um cluster ferro-enxofre 4Fe-4S e um domínio de ligação de ATP; mutações estão associadas aos fenótipos de xeroderma pigmentoso, síndrome de Cockayne e tricotiodistrofia.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas e a proteína está sujeita à conjugação de ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência dentro dos aminoácidos 600-700 do XPD/ERCC2 humano; considere que esta região pode ser conservada entre espécies, contribuindo para a reatividade cruzada observada com camundongo e rato.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 87kDa; valide a banda específica comparando com marcadores de peso molecular conhecidos e usando controles apropriados.
• Na imuno-histoquímica em secções embebidas em parafina (IHC-P), protocolos de recuperação de antígeno podem ser necessários para detecção ideal; recomenda-se testes piloto com tecidos de controle.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para capturar ou detectar peptídeos XPD/ERCC2 ou proteína recombinante; aconselha-se a otimização da concentração de revestimento e do formato de detecção.

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