Anticorpo Policlonal Anti-XPNPEP3 (Coelho) para WB, ELISA - Q9NQH7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do XPNPEP3

• XPNPEP3 (Xaa-Pro aminopeptidase 3), também conhecido como Aminopeptidase P3 (APP3), é uma metaloprotease dependente de manganês pertencente à família M24B de aminopeptidases. É codificado pelo gene XPNPEP3 e sofre splicing alternativo para gerar múltiplos isoformas.
• A enzima catalisa a remoção de um resíduo prolil penúltimo dos terminais N de peptídeos, com preferência por Pro, mas também mostra baixa atividade em relação a peptídeos com Ala ou Ser na posição P1. Referências relacionadas: PMID:25609706 PMID:28476889
• Além de seu papel catalítico, o XPNPEP3 funciona como uma proteína adaptadora na sinalização do TNF: promove a fosforilação mediada pelo TNFRSF1B de MAPK8/JNK1 e MAPK9/JNK2, independentemente de sua atividade peptidase, e pode inibir a morte celular apoptótica induzida por TNF.
• Estudos de localização subcelular revelam que o XPNPEP3 é direcionado principalmente para as mitocôndrias e também é encontrado no citoplasma; a presença de um peptídeo de trânsito mitocondrial facilita sua importação.
• XPNPEP3 é amplamente expresso em tecidos, sendo o isoforma 1 o transcrito mais abundante.
• Mutações no XPNPEP3 foram associadas à nefropatia tipo nefronoftise (NPHPL1), destacando sua importância na função renal.
• A proteína contém uma estrutura 3D e apresenta resíduos críticos de ligação a metais essenciais para sua atividade catalítica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio compreende os aminoácidos 32–230 do XPNPEP3 humano (NP_071381.1), uma região N-terminal ao domínio catalítico; assim, o anticorpo pode reconhecer múltiplos isoformas e fragmentos proteolíticos.
• No Western blotting (WB), múltiplas bandas correspondentes aos pesos moleculares observados (31 kDa, 32 kDa, 48 kDa, 54 kDa, 57 kDa) podem ser detectadas; valide as bandas esperadas usando controles positivos (por exemplo, lisados de células humanas ou de rato que expressam XPNPEP3) e considere o padrão de isoformas em seu sistema de amostra.
• Para aplicações de ELISA, a natureza policlonal deste anticorpo pode fornecer um sinal robusto; no entanto, etapas apropriadas de bloqueio e lavagem devem ser otimizadas, e o desempenho do ensaio deve ser verificado com proteína recombinante ou padrões de antígeno nativo.
• Dada a reatividade cruzada do anticorpo com o XPNPEP3 de rato, ele é adequado para estudos em modelos de rato; confirme a reatividade em seu tipo específico de tecido ou célula.

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