Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-YAP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P46937

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de YAP1

• Coativador e corepressor transcricional que atua como um efetor downstream crítico da via de sinalização Hippo, controlando o tamanho do órgão, proliferação e apoptose. Referências relacionadas: PMID:17974916 PMID:18280240 PMID:18579750
• Na via Hippo, as quinases MST1/2 fosforilam LATS1/2, que por sua vez fosforilam YAP1 em múltiplos sítios, impedindo sua translocação nuclear e promovendo sua retenção citoplasmática. Referências relacionadas: PMID:18158288 PMID:26598551 PMID:34404733
• YAP1 nuclear interage com fatores de transcrição TEAD para induzir a expressão de genes envolvidos no crescimento celular, crescimento independente de ancoragem e transição epitélio-mesenquimal (EMT). Referências relacionadas: PMID:18579750
• Regula a tensão tecidual e a forma 3D do tecido modulando a rede de actomiosina cortical por meio de ARHGAP18, uma proteína ativadora de GTPase Rho que suprime a polimerização de F-actina. Referências relacionadas: PMID:25778702
• Atua como corepressor transcricional de TEAD4 para suprimir a ciliogênese ao reprimir a expressão de AURKA e PLK1. Referências relacionadas: PMID:25849865
• Se localiza no citoplasma, núcleo, junções estreitas e membrana celular; realiza tráfego entre compartimentos em resposta à fosforilação e densidade celular.
• Está superexpresso em alguns cânceres de fígado e próstata; isoformas sem o domínio de transativação são encontradas em neurônios estriados de pacientes com doença de Huntington.
• É modificado pós-tradução por fosforilação, ubiquitinação e splicing alternativo; funciona tanto como ativador quanto como repressor, e é classificado como proto-oncogene.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (resíduos 155–504) cobre vários domínios regulatórios, incluindo os motivos de ligação a TEAD e porções do domínio de transativação; o anticorpo pode reconhecer YAP1 de comprimento completo e algumas isoformas de splicing.
• Para Western blot, é esperada uma banda predominante próxima a 54 kDa; no entanto, bandas adicionais podem aparecer devido a fosforilação, ubiquitinação ou variação de isoformas.
• Valide a especificidade do anticorpo no seu sistema modelo usando knockdown por siRNA ou moduladores da via Hippo (por exemplo, privação de soro para induzir a fosforilação e retenção citoplasmática de YAP1).
• Para imunofluorescência, observe que a localização de YAP1 é dependente da densidade celular; em condições de baixa confluência, ela é nuclear, enquanto em alta confluência, ela se torna citoplasmática.
• Otimize a recuperação de antígeno para IHC-P e inclua controles adequados (por exemplo, tecido conhecido por superexpressar YAP1, como certos carcinomas).

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