Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-YKL-40/CHI3L1 para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P36222

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do YKL-40/CHI3L1

• YKL-40/CHI3L1 é uma glicoproteína secretada de 39-43 kDa pertencente à família das glicosil hidrolases 18, que se liga à quitina com alta afinidade, mas carece de atividade catalítica de quitinase.
• Desempenha um papel fundamental na remodelação tecidual e ajuda as células a responder e lidar com mudanças ambientais, especialmente na inflamação crônica e reparo.
• Atua como um mediador chave na resposta inflamatória de células T auxiliadoras do tipo 2 (Th2) e na inflamação induzida por IL-13, regulando a sensibilização a alérgenos, apoptose de células inflamatórias, acúmulo de células dendríticas e diferenciação de macrófagos M2.
• Facilita a invasão de bactérias entéricas patogênicas na mucosa colônica e órgãos linfoides ao ativar a sinalização AKT1 e a subsequente produção de IL-8 nas células epiteliais colônicas.
• No pulmão, contribui para a morte bacteriana mediada por macrófagos, controla a disseminação bacteriana e aumenta a tolerância do hospedeiro contra infecções; também regula a lesão, inflamação e apoptose epitelial induzidas por hiperoxia.
• Subcelularmente, é secretada para o espaço extracelular, mas também é encontrada no citoplasma, região perinuclear e retículo endoplasmático.
• A expressão é altamente restrita a macrófagos ativados, condrócitos articulares, células sinoviais e fígado, com níveis muito baixos ou indetectáveis em cólon não inflamatório, tecidos musculares, pulmão, pâncreas, células mononucleares ou fibroblastos.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ligações dissulfeto; palavras-chave e links de doenças associadas abrangem antimicrobiano, apoptose, asma e esquizofrenia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo C-terminal (aa 284–383), que pode reconhecer as formas completa e clivada do YKL-40. Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 43 kDa, mas considere que a glicosilação pode causar ligeiras mudanças de mobilidade.
• Valide o anticorpo em amostras de controle positivo conhecidas por expressar YKL-40, como macrófagos ativados, sinóvia inflamada ou tecido hepático. Inclua controles negativos apropriados (por exemplo, cólon normal ou fibroblastos) onde a expressão é baixa.
• Para aplicações de imunofluorescência, observe que a proteína pode se localizar no citoplasma, área perinuclear e vesículas secretoras; a permeabilização é necessária para a detecção intracelular.
• Em ELISA, o emparelhamento deste anticorpo com um parceiro de captura/detecção requer otimização interna; teste contra YKL-40 recombinante ou proteína natural em meio condicionado.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada, mas a intensidade do sinal pode variar. Verifique a reatividade específica da espécie e titule as concentrações do anticorpo adequadamente para cada aplicação.

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