Anti-YOD1 Anticorpo Monoclonal de Coelho (WB, ELISA) - Q5VVQ6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização do YOD1

• YOD1 é uma tioesterase de ubiquitina pertencente à família OTU de deubiquitinases, com nomes alternativos DUBA-8, OTUD2 e HIN-7.
• Funciona como uma hidrolase que remove a ubiquitina conjugada das proteínas, desempenhando um papel crítico na degradação associada ao RE (ERAD) de proteínas luminais mal dobradas.
• O YOD1 pode aparar cadeias de ubiquitina em substratos para facilitar a sua passagem através do poro VCP/p97, pois as frações de ubiquitina podem impedir estericamente o encadeamento.
• A enzima exibe especificidade de ligação, clivando cadeias de poliubiquitina ligadas por Lys-27, Lys-29, Lys-33 e Lys-11.
• O YOD1 está implicado na macroautofagia, particularmente na limpeza de lisossomas danificados ao recrutar PLAA, UBXN6 e VCP para membranas lisossomais ubiquitinadas em K48. Referências relacionadas: PMID:27753622
• Localiza-se principalmente no citoplasma e contém um domínio de dedo de zinco, classificando-o como uma protease de tiol de ligação a metais.
• O splicing alternativo do gene YOD1 produz múltiplas isoformas, e o seu peso molecular é de aproximadamente 38 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, considere testar uma gama padrão de diluição do anticorpo (por exemplo, 1:500-1:2000) e otimizar usando lisados do seu sistema específico de células ou tecidos que expressa YOD1.
• Dado que o imunogénio é um peptídeo do domínio OTU (aa 249-348), confirme a especificidade do anticorpo incluindo controles de knockout YOD1 ou knockdown por siRNA.
• O desempenho em ELISA pode exigir otimização da concentração do antigénio de revestimento e das condições de incubação do anticorpo; titrações preliminares em xadrez (checkerboard) são recomendadas.
• O peso molecular previsto do YOD1 é de ~38 kDa; espera-se uma banda próximo deste tamanho em SDS-PAGE em condições redutoras, mas modificações pós-traducionais ou isoformas podem alterar a massa aparente.

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