Anticorpo Monoclonal Anti-Ythdc1 (Validado por KO) para WB - E9Q5K9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ythdc1

• Ythdc1 (proteína 1 contendo domínio YTH) é um leitor nuclear de N6-metiladenosina (m6A), uma modificação interna de mRNA prevalente, e reconhece e liga-se especificamente a RNAs contendo m6A. Referências relacionadas: PMID:29262316, PMID:29799838
• Atua como um regulador chave do splicing alternativo; promove a inclusão de éxons recrutando o fator de splicing SRSF3 para sítios de mRNA adjacentes ao m6A, enquanto inibe o salto de éxons através da competição com o SRSF10.
• Ythdc1 facilita a exportação nuclear de mRNAs modificados com m6A através da interação com SRSF3 e o fator de exportação NXF1.
• Contribui para a homeostase da S-adenosil-L-metionina regulando a expressão de MAT2A, provavelmente através da ligação a transcritos MAT2A metilados em m6A. Referências relacionadas: PMID:29262316
• Ythdc1 é essencial para o desenvolvimento da linhagem germinativa: é necessário para o desenvolvimento de espermatogónias em machos e para o crescimento e maturação de oócitos em fêmeas, pelo menos em parte através do seu papel no splicing alternativo. Referências relacionadas: PMID:29799838
• Independentemente da sua atividade de leitor de m6A, o Ythdc1 protege o fator de transcrição PPARG da degradação proteassomal mediada por ubiquitina, impedindo a sua interação com a ligase E3 ARIH2, apoiando assim o desenvolvimento do tecido adiposo marrom e a homeostase energética. Referências relacionadas: PMID:40355558
• Ythdc1 está localizado predominantemente no núcleo e concentra-se em speckles nucleares, consistente com as suas funções no processamento e splicing de mRNA.
• Funções adicionais reportadas incluem a ligação a m6A no RNA Xist para promover a inativação do cromossoma X e o reconhecimento de m6A em DNA de cadeia simples; a proteína também está sujeita a fosforilação e modificações semelhantes à ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo tem como alvo a região C-terminal (aa 597–736) do Ythdc1 de rato, que é altamente conservada no YTHDC1 humano; espera-se reatividade cruzada com amostras humanas.
• Para Western blotting, utilize SDS-PAGE padrão e transferência para membrana PVDF em condições redutoras. Deve ser observada uma banda próxima de 85 kDa; modificações pós-traducionais podem causar ligeiros desvios.
• Sendo um anticorpo validado por KO, recomenda-se a inclusão de lisados apropriados de células ou tecidos knockout como controlos negativos para confirmar a especificidade.
• Para aplicações de ELISA, considere a utilização do imunogénio de proteína recombinante para configuração e otimização do ensaio.
• Dada a conservação da sequência, a deteção em sistemas humanos pode exigir ajuste da diluição do anticorpo e das condições de incubação.

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