Anticorpo Policlonais Anti-YTHDC1 para WB e ELISA - Q96MU7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de YTHDC1

• YTHDC1 (YT521-B) é uma proteína que contém o domínio YTH que funciona como leitor das modificações de N6-metiladenosina (m6A) em RNAs e DNAs de fita simples.
• Ele se liga especificamente a mRNAs contendo m6A e regula o splicing alternativo recrutando os fatores de splicing SRSF3 e SRSF10, influenciando assim a inclusão ou exclusão de exons.
  Referências relacionadas: PMID:25242552 PMID:26318451 PMID:26876937
• YTHDC1 também facilita a exportação nuclear de mRNAs modificados com m6A por meio de interações com SRSF3 e NXF1.
  Referências relacionadas: PMID:28984244
• No núcleo, YTHDC1 se localiza em grânulos nucleares, que são sítios de processamento de pré-mRNA.
• Além do splicing, ele está envolvido na homeostase da S‑adenosil‑L‑metionina regulando a expressão de MAT2A e na inativação do cromossomo X mediada por Xist.
  Referências relacionadas: PMID:27602518 (para Xist)
• YTHDC1 também se liga a DNA de fita simples contendo m6A, sugerindo funções mais amplas de reconhecimento de ácidos nucleicos.
  Referências relacionadas: PMID:32663306
• É essencial para o desenvolvimento da linhagem germinativa, necessário para o desenvolvimento espermatogonial em machos e o crescimento de oócitos em fêmeas, provavelmente por meio de suas funções de splicing.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, formação de ligação isopeptídica e ubiquitinação, conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt.
• Independentemente da sua atividade de leitor de m6A, YTHDC1 estabiliza PPARG impedindo sua degradação mediada por ubiquitina, contribuindo para o desenvolvimento do tecido adiposo marrom.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 1–74 do terminal N de YTHDC1 humano; essa região pode ser conservada entre as espécies, o que suporta a reatividade cruzada observada com camundongo e rato.
• Para Western blot (WB), uma banda correspondente a aproximadamente 85 kDa (previsto) deve ser detectada. Considere o uso de gel de SDS-PAGE de 8–10% para uma resolução ideal.
• Devido ao splicing alternativo, múltiplas isoformas podem ser observadas; valide a especificidade usando controles adequados ou knockdown por siRNA na linhagem celular relevante.
• Para ELISA, pode ser usada a cobertura direta ou indireta do imunógeno recombinante ou lisados de células de origem humana, de camundongo ou de rato. Recomenda-se a titulação tanto do antígeno de revestimento quanto do anticorpo.
• Use anticorpos secundários anti-coelho padrão e reagentes de detecção otimizados para o seu sistema de imagem ou leitor de placas.

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