Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-YTHDF2 para WB, IHC, IF - Q9Y5A9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da YTHDF2

• A YTHDF2 é uma proteína leitora de N6-metiladenosina (m6A) que se liga especificamente a RNAs contendo m6A e regula sua estabilidade. Referências relacionadas: PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Promove a degradação de mRNAs com m6A via desadenilação por CCR4-NOT ou clivagem endorribonucleolítica por ribonuclease P/MRP, dependendo do contexto molecular. Referências relacionadas: PMID:27558897, PMID:30930054
• Os parálogos de YTHDF (YTHDF1, YTHDF2, YTHDF3) compartilham mRNAs alvo e atuam de forma redundante na degradação de mRNA e diferenciação celular. Referências relacionadas: PMID:28106072, PMID:32492408
• Subcelularmente, a YTHDF2 localiza-se no citosol, corpos P, grânulos de estresse e núcleo, e sofre separação de fase líquido-líquido para formar compartimentos sem membrana. Referências relacionadas: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Altamente expressa em células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) e regulada negativamente durante a diferenciação neural, ela inibe a especificação neural ao promover a degradação de mRNAs metilados específicos de neurônios. Referências relacionadas: PMID:32169943
• A YTHDF2 também regula o metabolismo lipídico hepático circadiano, a imunidade antiviral inata, a entrada mitótica e a espermatogênese através da degradação de mRNA dependente de m6A. Referências relacionadas: PMID:30428350, PMID:30559377, PMID:32267835
• Durante a infecção viral, a YTHDF2 pode promover a expressão gênica e a replicação de SV40 e KSHV ao se ligar a RNAs virais modificados por m6A. Referências relacionadas: PMID:29447282, PMID:29659627

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1–200) da YTHDF2 humana; considere esta localização do epítopo ao projetar ensaios multiplex ou ao usar padrões de proteína truncada.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 62 kDa; inclua lisados de controle positivo apropriados (por exemplo, HeLa, HEK293T) e otimize o carregamento de proteína para uma detecção clara.
• Em imunofluorescência (IF/ICC, IF-P), fixe e permeabilize as células de acordo com a localização citosólica e granular do alvo; valide os padrões de coloração em linhagens celulares positivas e negativas conhecidas.
• Para imuno-histoquímica em cortes de parafina (IHC-P), teste as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6.0 ou EDTA pH 9.0) e titule o anticorpo para reduzir o ruído de fundo.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com YTHDF2 de camundongo e rato, permitindo estudos translacionais em modelos de roedores; confirme a homologia de sequência se a especificidade absoluta for crítica.
• Como a YTHDF2 se liga a RNAs modificados por m6A, considere tratar as células com inibidores de metilação ou RNase ao avaliar a especificidade do sinal em contextos dependentes de RNA.

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