Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-ZBP1 para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H171

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ZBP1

• O ZBP1 (proteína de ligação ao Z-DNA 1), também conhecido como DAI (ativador dependente de ADN dos fatores reguladores de IFN) e DLM-1, é um sensor da imunidade inata de 46kDa que reconhece especificamente ácidos nucleicos em conformação Z, particularmente estruturas de Z-RNA produzidas durante a infeção viral.
• Funciona como um mediador chave da PANoptose (piroptose, apoptose, necroptose), uma via de morte celular integrada que defende contra patogénios. Ativa o RIPK3, a caspase-8 e o inflamossoma NLRP3 para orquestrar a morte celular inflamatória. Referências relacionadas: PMID:32200799
• Atua como um ativador crítico da necroptose: após a ligação ao Z-RNA, o ZBP1 interage e estimula o RIPK3, que fosforila o MLKL, desencadeando a execução da necrose programada.
• Durante a infeção pelo vírus da influenza A (IAV), o ZBP1 impulsiona a necroptose nuclear ao detetar Z-RNA no núcleo, levando à ativação do RIPK3-MLKL, à rutura do invólucro nuclear e ao fuga de ADN celular para o citosol. Referências relacionadas: PMID:32200799
• Componente do complexo PANoptossoma AIM2 que desencadeia a PANoptose em resposta à infeção bacteriana; também serve como o sensor apical da infeção fúngica que ativa a PANoptose.
• Em alguns tipos de células, o ZBP1 restringe a replicação viral através de mecanismos independentes da morte celular. Por exemplo, em neurónios infetados pelo vírus Zika, o ZBP1-RIPK3 aumenta a enzima ACOD1/IRG1, produzindo o metabolito itaconato que suprime a replicação do genoma viral.
• A localização subcelular inclui tanto o citoplasma como o núcleo, consistente com os seus papéis na deteção de ARN viral citosólico e de Z-RNA nuclear durante a infeção por ortomixovírus.
• Altamente expresso em tecidos linfáticos (gânglio linfático, leucócitos, amígdala, medula óssea, baço); também detetado no timo, pulmão e fígado. Referências relacionadas: PMID:11842111

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio cobre a região N-terminal (aminoácidos 1–170) contendo os domínios de ligação ao ADN Zα e Zβ, provavelmente permitindo o reconhecimento do ZBP1 de comprimento total e possivelmente algumas variantes de splicing. Verifique a reatividade com o sistema de amostra relevante.
• Para western blotting (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 46 kDa; os utilizadores devem considerar o uso de controlos positivos, como linhas de células imunes infetadas por vírus ou estimuladas (por exemplo, THP-1, U937), para confirmar a especificidade.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas, uma vez que o ZBP1 pode localizar-se tanto no citoplasma como no núcleo, dependendo do estado de ativação.
• Para aplicações de imunoprecipitação (IP) e ELISA, valide o desempenho do anticorpo em condições não desnaturantes e considere a reticulação a suportes sólidos, se necessário.
• Uma vez que este anticorpo é validado para a espécie humana, a reatividade cruzada com o ZBP1 de rato ou camundongo não é garantida; os utilizadores que necessitem de reatividade noutras espécies devem avaliar independentemente.

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