Anticorpo Policlonal Anti-ZFYVE9 para WB e ELISA - O95405

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ZFYVE9

• O ZFYVE9 (proteína 9 contendo o domínio dedo de zinco FYVE), também conhecido como SARA (âncora de Smad para ativação do recetor), é uma proteína adaptadora de endossoma inicial que pertence à família de proteínas contendo o domínio FYVE.
• Funciona principalmente na via de sinalização TGF-β ao recrutar o SMAD2 e o SMAD3 para o recetor TGF-β na membrana do endossoma inicial, facilitando a sua fosforilação e a subsequente translocação nuclear.
• A proteína modula a atividade transcricional do complexo SMAD3/SMAD4, regulando assim a expressão génica a jusante em resposta à estimulação TGF-β.
• O ZFYVE9 também pode estar envolvido na internalização do recetor TGF-β, contribuindo para a atenuação do sinal e para o tráfego do recetor.
• A nível subcelular, o ZFYVE9 localiza-se no citoplasma e especificamente no lado citoplasmático da membrana do endossoma inicial, onde o seu domínio FYVE se liga ao fosfatidilinositol 3-fosfato.
• A expressão é ubíqua, mas no cérebro encontra-se predominantemente nas células musculares lisas cerebrovasculares e nos astrócitos reativos, sugerindo funções específicas do tecido.
• A proteína sofre splicing alternativo e é classificada como uma fosfoproteína, com um domínio dedo de zinco que medeia a coordenação de iões metálicos, essencial para a sua localização endossomal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio utilizado para este anticorpo corresponde aos 260 aminoácidos terminais N; esta região pode ser menos conservada entre variantes de splicing, pelo que deve validar a deteção do seu isoalvo em lisados celulares relevantes.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima de 156 kDa; utilize uma percentagem de gel apropriada e condições de transferência para proteínas de alto peso molecular, e inclua um controlo positivo, como lisado de células HeLa ou HEK293.
• Em ELISA, revestir com proteína ZFYVE9 recombinante ou um péptido da sequência do imunogénio; titule o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal e confirme a especificidade com um poço não revestido.
• Como anticorpo policlonal, pode reconhecer múltiplos epítopos; considere testar a consistência lote a lote se for utilizado para ensaios quantitativos e inclua sempre controlos apropriados.

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