Anticorpo Monoclonal APC Anti-CD25 para Citometria de Fluxo - P01590

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD25

• A subunidade alfa do recetor de interleucina-2 (CD25), também conhecida como p55, é codificada pelo gene Il2ra em ratos e é um componente-chave do recetor de IL-2 de alta afinidade, essencial para a homeostase imunológica adequada.
• O CD25 é expresso constitutivamente em níveis elevados em células T reguladoras (TREGs) e é crítico para a sua função na manutenção da tolerância imunológica, suprimindo a ativação e expansão de células T autorreativas.
• A proteína é uma glicoproteína transmembranar tipo I de passagem única, com uma região extracelular contendo dois domínios sushi (CCP/SCR) que facilitam a ligação do ligando e a formação do complexo recetor.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e formação de ligações dissulfeto, que são importantes para a correta dobragem e estabilidade do domínio extracelular.
• A localização subcelular é principalmente na membrana plasmática, com uma cauda citoplasmática curta envolvida na transdução de sinal após a ligação da IL-2.
• O CD25 também é transitoriamente regulado positivamente em células T convencionais ativadas, células B e células NK, servindo como um marcador precoce de ativação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange o domínio extracelular (aminoácidos 22-236) do CD25 de rato, o que se espera que gere anticorpos que reconheçam o recetor de superfície nativo, bem adequado para aplicações de citometria de fluxo.
• Para citometria de fluxo, faça uma titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo celular específico e condições experimentais, utilizando controlos positivos (por exemplo, células T ativadas) e negativos relevantes.
• A coloração de superfície pode ser realizada em células vivas não fixadas; evite a fixação com reagentes que possam alterar o fluoróforo APC ou a acessibilidade do epítopo, a menos que validado.
• Considere a co-coloração com marcadores como Foxp3 (intracelular) ou CD4 para identificar subconjuntos de Tregs ou células T ativadas em amostras murinas.

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