Anticorpo Monoclonal APC Anti-Humano CD163 para Citometria de Fluxo - Q86VB7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD163

• O CD163, também conhecido como proteína 1 rica em cisteína do receptor scavenger tipo M130 ou receptor scavenger de hemoglobina, é membro da superfamília de receptores scavenger ricos em cisteína (SRCR). É codificado pelo gene CD163 (ID do Gene: 9332) e existe em múltiplas isoformas geradas por splicing alternativo. A isoforma 1 é a menos abundante no sangue, enquanto a isoforma 3 é a predominante detectada no sangue.
• O receptor desempenha um papel fundamental na depuração, mediada por macrófagos, de complexos de hemoglobina/haptoglobina, protegendo os tecidos contra danos oxidativos induzidos pela hemoglobina livre. Ele se liga a esses complexos de maneira dependente de cálcio e pH, apresentando maior afinidade por complexos que contêm haptoglobina multimérica (fenótipo HP1F) em comparação com a haptoglobina dimérica (fenótipo HP1S).
• Após a ligação ao ligante, o CD163 desencadeia uma sinalização intracelular que envolve a mobilização de cálcio dependente de tirosina-quinase e a produção de trifosfato de inositol, levando à secreção de IL-6 e CSF-1. A isoforma 3 apresenta a maior capacidade de endocitose do ligante e expressão na superfície.
• Após a clivagem proteolítica, a forma solúvel (sCD163) atua como mediador anti-inflamatório e serve como marcador diagnóstico da ativação de macrófagos em diversas condições inflamatórias.
• A localização subcelular inclui a membrana celular, como uma proteína transmembrana do tipo I de passagem única, e também a secreção como um ectodomínio solúvel após a clivagem.
• O CD163 é especificamente expresso em monócitos e macrófagos maduros dos tecidos, incluindo células de Kupffer no fígado, macrófagos da polpa vermelha no baço, macrófagos corticais no timo, macrófagos residentes da medula óssea e macrófagos meníngeos do sistema nervoso central.
• A proteína é glicosilada e contém múltiplos domínios SRCR, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática. É classificada como uma proteína de fase aguda e está implicada na regulação das respostas inflamatórias.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo conjugado com APC foi desenvolvido para a detecção de CD163 humano por citometria de fluxo. Como o CD163 é abundantemente expresso em monócitos e macrófagos, considere estratégias de gating que incluam essas populações celulares.
• Para uma coloração ideal, realize a titulação do anticorpo a fim de determinar a concentração apropriada. O APC é um fluorocromo brilhante; certifique-se de configurar corretamente a compensação, especialmente ao realizar co-coloração com outros fluoróforos.
• Como o CD163 é liberado da superfície celular, considere o uso de um anticorpo anti-CD163 que reconheça o domínio extracelular para uma coloração de superfície confiável. O imunógeno utilizado para este anticorpo é uma proteína recombinante, portanto, é provável que ele se ligue à porção extracelular.
• Inclua controles de isotipo apropriados e corantes de viabilidade em seu painel de citometria de fluxo para excluir células mortas ou ligações inespecíficas. Valide o anticorpo em seu sistema experimental específico, pois os níveis de expressão podem variar de acordo com a ativação celular ou o estado da doença.

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