Anticorpo Monoclonal Anti-LGR5 APC para Citometria de Fluxo - O75473

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LGR5

• O LGR5 (também conhecido como GPR49, GPR67 ou HG38) é um recetor acoplado à proteína G que contém repetições ricas em leucina e serve como recetor para R-spondinas (RSPO1–RSPO4).
• Ao ligar-se às R-spondinas, o LGR5 potencializa a via de sinalização Wnt canónica, associando-se ao LRP6 fosforilado e aos recetores frizzled, aumentando assim a expressão de genes alvo de Wnt.
• Em contraste com os recetores acoplados à proteína G clássicos, o LGR5 não ativa proteínas G heterotriméricas para transduzir sinais.
• O LGR5 é um marcador de células estaminais bem estabelecido do epitélio intestinal e do folículo piloso, desempenhando um papel crítico no desenvolvimento e manutenção das células estaminais intestinais adultas durante o desenvolvimento pós-embrionário.
• O recetor localiza-se principalmente na membrana celular, sendo também detetado no aparelho de Golgi e na membrana da rede trans-Golgi.
• A expressão é encontrada no músculo esquelético, placenta, medula espinhal e várias regiões cerebrais; dentro do intestino, marca células estaminais na base das criptas no epitélio mucoso do cólon e do intestino delgado, e a sobreexpressão é relatada em cancros do ovário, cólon e fígado.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e formação de pontes dissulfeto. A proteína existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange os aminoácidos 480–580 do LGR5 humano, uma região intracelular. O conjugado APC permite a deteção direta por citometria de fluxo sem anticorpo secundário.
• Para citometria de fluxo, considere testar os protocolos de coloração de superfície de células vivas e de coloração intracelular, pois a acessibilidade do epítopo pode variar; a permeabilização pode ser necessária se o epítopo visado pelo anticorpo não estiver exposto na superfície extracelular.
• O LGR5 é expresso em populações de células estaminais; a dissociação apropriada do tecido em suspensões de células únicas e o seletor (gating) de células viáveis são recomendados para a identificação precisa de células LGR5+.
• Valide o anticorpo no sistema experimental relevante (por exemplo, organoides intestinais humanos, linhas de células cancerígenas ou tecido primário) usando controlos apropriados.

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