Anticorpo monoclonal anti-Siglec-7/CD328 conjugado com APC (Coelho) para citometria de fluxo - Q9Y286

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Siglec-7/CD328

• A Siglec-7 (lectina 7 semelhante à Ig ligante de ácido siálico), também conhecida como CD328, AIRM-1, p75 ou D-siglec, é uma proteína transmembrana do tipo I pertencente à superfamília das imunoglobulinas e à família das lectinas siglec ligantes de ácido siálico.
• Funciona como um receptor inibitório nas células imunes, ligando-se preferencialmente a ácidos siálicos ligados por α-2,3 e α-2,6 nas células-alvo; o envolvimento do ligante desencadeia a fosforilação de tirosina de seus motivos ITIM, recrutando fosfatases contendo domínios SH2 para bloquear sinais de ativação.
• Desempenha um papel fundamental na regulação da citotoxicidade das células natural killer (NK), inibindo a eliminação de alvos que expressam ácido siálico; também suprime a diferenciação de precursores hematopoiéticos CD34+ em direção à linhagem mielomonocítica e inibe a proliferação de células mieloides leucêmicas.
• É expressa predominantemente em células NK em repouso e ativadas, e em níveis mais baixos em granulócitos e monócitos; observa-se alta expressão na placenta, fígado, pulmões, baço e leucócitos do sangue periférico.
• Está localizada na membrana plasmática como uma proteína transmembrana de passagem única; a região extracelular contém domínios semelhantes à Ig do tipo C2 responsáveis pelo reconhecimento do ácido siálico, que podem ser mascarados por interações cis na mesma superfície celular.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, formação de pontes dissulfeto e fosforilação, sendo os sítios de fosfotirosina utilizados como locais de ancoragem para proteínas com domínio SH2.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcritos, potencialmente modulando as propriedades de ligação ao ligante ou os níveis de expressão.
• Estudos estruturais (estrutura 3D disponível) revelam a base molecular da especificidade pelo ácido siálico, contribuindo para a compreensão de suas funções imunomoduladoras.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Este anticorpo conjugado com APC (clone não especificado) foi produzido contra o domínio extracelular (aa 18-144) da Siglec-7 humana, sendo adequado para detectar a expressão na superfície celular por citometria de fluxo.
• Para FC, titule o anticorpo para determinar a concentração ideal; use um controle de isotipo correspondente para definir os gates e avaliar o fundo.
• Valide a marcação em linhagens celulares positivas conhecidas ou em células NK humanas primárias; a reatividade cruzada foi relatada apenas para humanos, portanto, certifique-se de que o sistema experimental envolva amostras humanas.
• Considere que a Siglec-7 pode sofrer interações cis que mascaram os epítopos; o pré-tratamento com sialidase pode aumentar a detecção em alguns tipos celulares.
• Este produto é fornecido como um conjugado com APC; manuseie-o com cuidado para evitar fotobranqueamento e utilize controles de compensação adequados em painéis multicoloridos.

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