Anticorpo monoclonal de camundongo anti-CD3 humano conjugado com APC para citometria de fluxo - P07766

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD3 epsilon

• CD3E (cadeia epsilon do CD3, também denominada T3E, TCRE, IMD18) é uma subunidade do complexo TCR-CD3 expressa nas células T e essencial para a imunidade adaptativa. Referências relacionadas: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098

• Após o envolvimento do TCR, o CD3E, juntamente com outras cadeias do CD3, transduz sinais de ativação através da membrana por meio de seus motivos de ativação baseados em tirosina de imunorreceptores (ITAMs). Referências relacionadas: PMID:2470098 PMID:40592325

• A fosforilação dos ITAMs por LCK e FYN cria locais de ancoragem para ZAP70, desencadeando cascatas de sinalização a jusante, incluindo o fluxo de cálcio e as vias MAPK/ERK. Referências relacionadas: PMID:2470098 PMID:40592325

• O CD3E é essencial para o desenvolvimento das células T; participa da seleção e maturação dos timócitos.

• Contém motivos de endocitose que mediam a internalização e a redução da expressão na superfície do complexo TCR-CD3, regulando a duração do sinal. Referências relacionadas: PMID:10384095 PMID:26507128

• O CD3E também atua como receptor do ITPRIPL1, que inibe a ativação das células T ao promover a interação com NCK1 e bloquear a ligação de ZAP70 e a sinalização de NF-kB. Referências relacionadas: PMID:12110186 PMID:38614099

• Subcelularmente, o CD3E está localizado na membrana celular, em consonância com seu papel no reconhecimento de ligantes extracelulares e na transdução de sinais.

• É caracterizado por um peptídeo sinal, um domínio de imunoglobulina, uma hélice transmembrana e motivos ITAM citoplasmáticos; sofre fosforilação e formação de pontes dissulfeto.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração ideal de marcação para sua população celular; normalmente, 0,5–5 µg por 1×10⁶ células é um ponto de partida.
• Inclua controles de isotipo apropriados e controles de fluorescência menos um (FMO) para garantir a especificidade.
• O conjugado APC pode ser excitado por lasers de 633–647 nm; minimize a exposição à luz para evitar o fotobranqueamento.
• Por ser um anticorpo derivado de proteína recombinante, reconhece a cadeia epsilon nativa do CD3; pode ser necessária fixação/permeabilização para epítopos intracelulares.
• Este anticorpo foi validado para amostras humanas; a reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada. Portanto, teste-o em sistemas-modelo relevantes, se necessário.

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