Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Humano CD117/c-Kit conjugado com APC para FC - P10721

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD117/c-Kit

• O CD117/c-Kit, também conhecido como receptor do fator de crescimento de mastócitos/células-tronco Kit, é um receptor tirosina quinase transmembrana codificado pelo proto-oncogene KIT. Pertence à família de receptores tirosina quinase tipo III e é caracterizado por domínios imunoglobulina-like extracelulares, uma única hélice transmembrana e um domínio quinase intracelular dividido.
• A função principal do CD117/c-Kit é servir como receptor de superfície celular para o fator de células-tronco (SCF/KITLG). Após a ligação do ligante, o KIT dimeriza, levando à autofosforilação e ativação de múltiplas cascatas de sinalização a jusante, incluindo as vias PI3K/AKT, RAS/MAPK e JAK/STAT.
• Através dessas vias, o CD117/c-Kit regula processos celulares essenciais, como sobrevivência, proliferação, diferenciação e migração celular. Desempenha papéis críticos na hematopoiese, manutenção de células-tronco, gametogênese, melanogênese e desenvolvimento e função de mastócitos.
• O CD117/c-Kit está predominantemente localizado na membrana celular, mas após a ativação pode ser internalizado e encontrado transitoriamente no citoplasma antes da degradação ou reciclagem.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação N-ligada, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação. A fosforilação induzida por ligante em múltiplos resíduos de tirosina cria sítios de ancoragem para proteínas de sinalização contendo domínio SH2, propagando assim o sinal.
• No testículo humano, o CD117/c-Kit é expresso em espermatogônias e células de Leydig intersticiais, mas não em células de Sertoli ou espermatócitos. Sua expressão persiste em espermatozoides ejaculados. Referências relacionadas: PMID:20601678

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo compreende os aminoácidos 26-520 do CD117/c-Kit humano, correspondentes ao domínio extracelular. Este design pode conferir especificidade para o receptor nativo na superfície celular.
• Este anticorpo é conjugado com APC (aloficocianina) para aplicações diretas de citometria de fluxo. Considere o uso de controles de compensação apropriados ao realizar citometria de fluxo multicolor e evite a exposição prolongada à luz para preservar a estabilidade do fluoróforo.
• Para citometria de fluxo, valide o anticorpo em linhagens celulares humanas conhecidas por expressar CD117 (por exemplo, HEL, M-07e ou células primárias de medula óssea). Inclua um controle de isotipo apropriado para avaliar a ligação inespecífica.
• A concentração ideal do anticorpo deve ser determinada por experimentos de titulação no sistema experimental relevante. A fixação e permeabilização celular podem afetar a ligação deste anticorpo, portanto, avalie a compatibilidade se alvos intracelulares também forem corados.

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